[發明專利]一種生長抑素的合成方法

有效

• 申請號: 200910142420.2
• 申請日: 2009-06-03
• 公開（公告）號: CN101570570A
• 公開（公告）日: 2009-11-04
• 發明（設計）人: 達朝山;蘇亞寧;洪滿貴;保英明;曹福軍
• 申請（專利權）人: 蘭州大學;甘肅中科藥源生物工程股份有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/06;C07K1/02;A61P5/02;A61P5/08;A61P5/48;A61P1/04;A61P1/18;A61P7/04
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司
• 代理人: 張 晉

技術領域

本發明涉及生長抑素的一種液相合成方法。

背景技術

中文名：生長抑素。其他名：生長激素釋放抑制激素。商品名：施他寧。英文名： Somatostatin，Stilamin。

結構式為：

分子式：C₇₆H₁₀₄N₁₈O₁₉S₂；分子量：1637.8。

生長抑素是下丘腦的正中隆起和胰島的細胞合成的。1973年由Burgus和Brazean 等人首先在下丘腦分離得到并闡述其結構?；瘜W結構為分子內帶有一對二硫鍵的十四 肽。人工合成的生長抑素已成為商品用于臨床，并于1997年收載入歐洲藥典。

生長抑素的藥理作用如下：：①可以抑制生長激素、甲狀腺刺激激素、胰島素、胰高 血糖素的分泌。②可以抑制由試驗餐和5肽胃泌素刺激的胃酸分泌，可抑制胃蛋白酶、 胃泌素的釋放。③可以顯著減少內臟血流，降低門靜脈壓力，降低側枝循環的血流和 壓力，減少肝臟血流量。④減少胰腺的內外分泌以及胃小腸和膽囊的分泌，降低酶活 性，對胰腺細胞有保護作用。⑤抑制胰高血糖素的分泌。⑥可影響胃腸道吸收和營養 功能。藥物的適應癥為：用于肝硬化門脈高壓所致的食管靜脈出血；消化性潰瘍應激性 潰瘍、糜爛性胃炎所致的上消化道出血；預防和治療急性胰腺炎及其并發癥；胰、膽、 腸瘺的輔助治療；其他：肢端肥大癥、胃泌素瘤、胰島素瘤及血管活性腸肽瘤。

固相多肽合成法合成生長抑素的報道：1973至1974年，Donald?Yamashiro和Jean?E.F. Rivier等人分別報道了采用氯甲基樹脂固相合成生長抑素，采用常規的固相合成方法合成保 護十四肽，但采用HF脫側鏈保護；中國專利02155189.8、03128951.7、200510029220.8等采 用三苯甲基、2-氯三苯甲基、4-甲氧基、4-甲基樹脂為起始原料，按固相合成的方法依次連接 Fmoc保護氨基酸，得到保護十四肽樹脂，再用TFA切肽試劑脫保護，用空氣或MDSO氧化 環化，得到生長抑素粗品，最后經C18或C8高壓柱分離得到生長抑素精品。雖然具有接肽 速率快，收率高，周期短等優點，但仍存在問題：隨著合成的肽鏈的增長，會出現空間位阻 等空間因素，阻礙氨基酸的合成，且合成過程易消旋，使產品旋光度降低。因此，為使反應 完全每步接肽需要3-5倍的羧基組分和縮合劑且價格昂貴，需大量的DMF和乙醇洗滌(約 200ml/mmol)，浪費原料和試劑，還需要昂貴的多肽合成儀等大型設備。還有，固相合成產物 的純化難度大、周期長，生產規模較小，成本高。

液相多肽合成法合成生長抑素的報道：美國專利USP.4,337,194；3,862,295；3,917,578和德 國L.Moroder，加拿大Hans?U.Immer等人與1973年至1981年報道了采用液相多肽合成法合成 本品的方法。在L.Moroder和Hans?U.Immer等報道的液相合成法合成本品的方法中，采用Z 保護氨基酸進行接肽，需要多步H2/Pd反應，理論操作難，且難以大量制備。USP?3,862,295 和D.Sarantakis等人的報道中，采用氟化氫去保護，實驗設備和氟化氫的儲運都難以實現。 USP3,917,578和Roy?Wade等人采用合成十四線肽后，先氧化形成二硫鍵，再去保護，使二 硫鍵的形成具有位阻降低了收率。因此這些技術方案均難以作為大量生產的方法。

發明內容

本發明提供一種可解決上述中的不足，設計操作簡單，反應過程消旋度底，純度和收率 高，生產成本低，產品質量好的合成生長抑素方法。

本發明的生長抑素合成方法為液相法，它是首先分別全合成Thr(Bzl)-Phe-Thr(Bzl)-Ser (Bzl)-Cys(MeOBzl)-OBzl、Boc-Phe-Trp-Lys(Z)-OH、Boc-Asn-Phe-OH和Boc-Ala-Gly-Cys(MeO Bzl)-Lys(Z)-OH四4個片段肽，再用EDCI/HOBt進行片段縮合，合成全保護的還原性十四肽， 用三氟甲磺酸和苯甲醚系統脫肽鏈所有的保護基，得到還原性生長抑素，對還原性生長抑素 氧化，獲得生長抑素粗品，再經C18制備柱分離純化，收集樣品洗脫液凍干后，得生長抑素 精品。