[發(fā)明專利]一種不含明膠的疫苗凍干保護(hù)劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910138411.6
• 申請日: 2009-04-30
• 公開（公告）號: CN101537186A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱昌林;沈艷杰;祝洪敢;李海泉;孫會(huì)來;徐艷君;張喆;王曉麗
• 申請（專利權(quán)）人: 長春百克生物科技有限公司
• 主分類號: A61K47/42
• 分類號: A61K47/42;A61K47/36;A61K47/26;A61K47/18;A61K47/10;A61K39/25;A61P31/22
• 代理公司: 北京北翔知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 張廣育;姜建成

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于疫苗生產(chǎn)工藝技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種不含明膠的疫苗保護(hù)劑的配方和使用方法。

背景技術(shù)

目前，預(yù)防性疫苗的應(yīng)用使常見流行性傳染病得到了有效控制，有效地降低了這些傳染病的發(fā)病率和死亡率。但是，在貯藏、運(yùn)輸和臨床使用過程中，應(yīng)用現(xiàn)有生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的疫苗產(chǎn)品不斷地浮現(xiàn)一系列問題，諸如穩(wěn)定性差，有效期短和不良反應(yīng)率高等問題。隨著疫苗的廣泛應(yīng)用和分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的飛速發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)，很多問題與疫苗產(chǎn)品的保護(hù)劑和佐劑有直接關(guān)系，特別是凍干疫苗產(chǎn)品中均需要使用凍干保護(hù)劑，其中的明膠或明膠衍生物能直接引起使被接種者過敏的變態(tài)反應(yīng)。1993年，Kelso等報(bào)道，有些孩子對MMR聯(lián)合疫苗過敏是由于疫苗中的明膠在被接種者機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生抗明膠分子的IgE抗體所致。明膠既可以引起細(xì)胞介導(dǎo)免疫反應(yīng)，也可以引起非細(xì)胞介導(dǎo)免疫反應(yīng)。為了減輕或避免在疫苗使用過程中出現(xiàn)的由明膠而引起的不良反應(yīng)，專家們建議，使用明膠替代品或直接生產(chǎn)不含明膠的疫苗產(chǎn)品。

現(xiàn)有疫苗產(chǎn)品多數(shù)是以世界衛(wèi)生組織所頒發(fā)的生物制品規(guī)程為標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)的，標(biāo)準(zhǔn)中沒有對保護(hù)劑中的明膠使用量明確加以限制。日本FDA于1986年批準(zhǔn)的疫苗上市許可中，以及美國FDA批準(zhǔn)的疫苗上市許可中，均沒有把明膠作為生產(chǎn)疫苗的禁用成分。在早期的專利文獻(xiàn)中，大多數(shù)生產(chǎn)技術(shù)的疫苗保護(hù)劑都含有明膠成分。

目前已經(jīng)逐步開始研究和使用不含有明膠的疫苗產(chǎn)品。目前現(xiàn)有技術(shù)中不含明膠的疫苗保護(hù)劑雖然降低了對于人體的刺激性，但是對疫苗的保護(hù)效果不如常用的含有明膠的保護(hù)劑，使得疫苗在凍干過程中和儲存過程中的穩(wěn)定性下降，易發(fā)生失效。

目前，使用疫苗進(jìn)行免疫接種已經(jīng)成為世界各國預(yù)防流行病的主要手段。因此，本領(lǐng)域中急需一種改進(jìn)的疫苗凍干保護(hù)劑，在降低對于人體的刺激性的同時(shí)仍能使疫苗具有較高的穩(wěn)定性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過研究，發(fā)明了一種新的疫苗凍干保護(hù)劑，使用該保護(hù)劑得到的疫苗制品對于人體的刺激性大大降低，并且仍然能保持較高的穩(wěn)定性和較長的有效期。

因此，本發(fā)明提供了一種用作疫苗凍干保護(hù)劑的組合物，所述組合物在用于疫苗的凍干過程時(shí)，所包括的各成分及其在凍干原液中的初始濃度為：人血清白蛋白3-20g/l、蔗糖30-100g/l、海藻糖10-30g/l、右旋糖酐10-50g/l、谷氨酸鈉6-12g/l、尿素3-9g/l、精氨酸0.5-2g/l以及甘露醇10-100g/l，并且所述組合物中不含有明膠。

此外，本發(fā)明還提供了一種凍干疫苗的制備方法，其特征在于凍干過程中采用本發(fā)明的組合物。

此外，本發(fā)明還提供了本發(fā)明的組合物用于提高疫苗穩(wěn)定性和安全性的用途。

本發(fā)明的凍干保護(hù)劑與現(xiàn)有技術(shù)的保護(hù)劑相比，對疫苗的保護(hù)效果更好。將本發(fā)明的凍干保護(hù)劑用于制備凍干疫苗時(shí)，可以提高疫苗在凍干過程和儲存過程中的穩(wěn)定性，并且大大提高了凍干疫苗產(chǎn)品對人體的安全性。

具體實(shí)施方式

因此，本發(fā)明提供了一種用作疫苗凍干保護(hù)劑的組合物，所述組合物在用于疫苗的凍干過程時(shí)，所包括的各成分及其在凍干原液中的初始濃度為：人血清白蛋白3-20g/l、蔗糖30-100g/l、海藻糖10-30g/l、右旋糖酐10-50g/l、谷氨酸鈉6-12g/l、尿素3-9g/l、精氨酸0.5-2g/l以及甘露醇10-100g/l，并且所述組合物中不含有明膠。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述右旋糖酐為右旋糖酐70。

在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，上述的本發(fā)明組合物中的蔗糖在凍干原液中的初始濃度為40-60g/l。

在本發(fā)明的又另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，上述的本發(fā)明組合物中的海藻糖在凍干原液中的初始濃度為10-30g/l。

在本發(fā)明的再另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，上述的本發(fā)明組合物中的甘露醇在凍干原液中的初始濃度為10-20g/l。

在本發(fā)明的第二方面，提供了一種凍干疫苗的制備方法，其特征在于在凍干過程中采用本發(fā)明的組合物。

在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種凍干水痘疫苗的制備方法，包括下列步驟：

(1)以水痘病毒Oka株為毒種，MRC-5株人二倍體細(xì)胞為培養(yǎng)基質(zhì)；

(2)用培養(yǎng)基對MRC-5株人二倍體細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增傳代，其中細(xì)胞傳代比例為1∶2-1∶4，以37℃培養(yǎng)3-5天；

(3)待MRC-5株人二倍體細(xì)胞生長成均勻、致密的單層細(xì)胞后，更換培養(yǎng)基維持液并加入毒種感染細(xì)胞；