[發明專利]一種不含明膠的疫苗凍干保護劑

有效

• 申請號: 200910138411.6
• 申請日: 2009-04-30
• 公開（公告）號: CN101537186A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發明（設計）人: 朱昌林;沈艷杰;祝洪敢;李海泉;孫會來;徐艷君;張喆;王曉麗
• 申請（專利權）人: 長春百克生物科技有限公司
• 主分類號: A61K47/42
• 分類號: A61K47/42;A61K47/36;A61K47/26;A61K47/18;A61K47/10;A61K39/25;A61P31/22
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司
• 代理人: 張廣育;姜建成

1.一種用作水痘疫苗凍干保護劑的組合物，所述組合物所包括的各成分及其在凍干原液中的初始濃度為：人血清白蛋白3-20g/l、蔗糖30-100g/l、海藻糖10-30g/l、右旋糖酐10-50g/l、谷氨酸鈉6-12g/l、尿素3-9g/l、精氨酸0.5-2g/l以及甘露醇10-100g/l，并且所述組合物中不含有明膠。

2.權利要求1所述的組合物，其中所述右旋糖酐為右旋糖酐70。

3.權利要求1所述的組合物，其中所述蔗糖在凍干原液中的初始濃度為40-60g/l。

4.權利要求1所述的組合物，其中所述海藻糖在凍干原液中的初始濃度為15-30g/l。

5.權利要求1所述的組合物，其中所述甘露醇在凍干原液中的初始濃度為10-20g/l。

6.一種凍干水痘疫苗的制備方法，其特征在于在凍干過程中采用權利要求1所述的組合物。

7.一種凍干水痘疫苗的制備方法，其特征在于在凍干過程中采用權利要求2-5任一項所述的組合物。

8.權利要求6所述的制備方法，包括下列步驟：

(1)以水痘病毒Oka株為毒種，MRC-5株人二倍體細胞為培養基質；

(2)用培養基對MRC-5株人二倍體細胞進行擴增傳代，其中細胞傳代比例為1∶2-1∶4，以37℃培養3-5天；

(3)待MRC-5株人二倍體細胞生長成均勻、致密的單層細胞后，更換培養基維持液并加入毒種感染細胞；

(4)當MRC-5株人二倍體細胞出現75％以上典型病變時，倒去原維持液，用相當于維持液2倍-3倍體積的洗滌液洗滌細胞表面；

(5)加入疫苗液收獲細胞培養物，所述疫苗液為含有3-20g/l人血清白蛋白、30-100g/l蔗糖、10-30g/l海藻糖、10-50g/l右旋糖酐、6-12g/l谷氨酸鈉、3-9g/l尿素和0.5-2g/l精氨酸的199綜合培養基或PBS緩沖液；

(6)將細胞培養物經-70℃以下凍融、超聲破碎細胞、經澄清過濾后，即為凍干原液；

(7)在所述凍干原液內加入10-100g/l的甘露醇，進行凍干。

9.權利要求8所述的方法，其中在步驟(3)中維持液為pH7.2-7.6、含2％-5％小牛血清的MEM培養基；和/或其中在步驟(3)中毒種與細胞接種比例為1∶60-1∶250；和/或其中在步驟(4)中洗滌液為Earle’s液或PBS緩沖液。

10.權利要求1至5任一項的組合物用于提高凍干疫苗的穩定性和安全性的用途。