[發明專利]一種新型畜用肽苗及其制備方法

無效

• 申請號: 200910136654.6
• 申請日: 2009-05-12
• 公開（公告）號: CN101579522A
• 公開（公告）日: 2009-11-18
• 發明（設計）人: 陶鈺;邵國虎
• 申請（專利權）人: 陶鈺;邵國虎
• 主分類號: A61K39/135
• 分類號: A61K39/135;A61K38/16;A61P31/14;C07K14/09;C07K1/16;C07K1/12;C07K1/06;C07K1/04
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1.一種抗口蹄疫病毒的肽疫苗，其特征在于肽抗原具有如SEQ?ID NO：1、SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列。

2.權利要求1中所述疫苗，其特征在于，所述疫苗還包含相應的 佐劑。

3.權利要求1所述的肽疫苗在制備預防和/或治療口蹄疫的藥物中 的用途。

4.一種根據權利要求1中所述的肽疫苗的制備方法，主要包括以 下步驟：

(1)抗原肽的化學合成；

(2)抗原肽的裂解、沉淀；

(3)高壓液相色譜分離純化多肽抗原；

(4)疫苗配置。

5.根據權利要求4所述的疫苗制備方法，抗原肽的化學合成其特 征在于，是以氨基樹脂和9芴甲氧羰基(Fmoc)氨基酸為原料，逐步 接上氨基酸，每步接肽反應后用乙酰咪唑封閉未反應的活性氨基端，主 要包括如下步驟：

(a)FMOC基團脫除：用含15％-35％六氫吡啶的二甲基甲酰氨 (DMF)溶液在20-26℃條件反應20-40分鐘脫除氨基上保護的FMOC 基團，氮氣吹干，二甲基甲酰氨(DMF)洗滌樹脂；

(b)接肽反應：加入1-羥基苯丙三氮唑(HOBT)、苯并三氮唑 -N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、二異丙基乙胺(DIEA)與 FMOC保護的氨基酸在20-28℃條件反應0.5-2.5小時，氮氣吹干，二甲 基甲酰氨(DMF)洗滌樹脂；

(c)封閉反應：使用1.5％-3.5％的乙酰咪唑在20-26℃條件反應15-30 分鐘。

6.根據權利要求4所述疫苗的制備方法，其中所述多肽抗原裂解 所用試劑為：三氟乙酸(TFA)/苯酚(Phenol)/H₂O＝90/8/2，裂解時 間為1-3小時。

7.根據權利要求4所述疫苗的制備方法，特征在于，疫苗配制的 方法包括如下：

(a)用注射用水將肽抗原稀釋到30-200μg/ml；

(b)將油佐劑高壓滅菌后備用。

(c)在20-28℃條件下將抗原水相與油佐劑按照5∶5的比例進行乳化， 分裝后即得到肽疫苗。