[發明專利]人源5,10-次甲基四氫葉酸合成酶及其復合物的結晶方法、晶體以及應用

無效

• 申請號: 200910134474.4
• 申請日: 2009-04-17
• 公開（公告）號: CN101781637A
• 公開（公告）日: 2010-07-21
• 發明（設計）人: 劉志杰;武棟;尼爾·肖恩;成沖云;宋高潔;李楊
• 申請（專利權）人: 中國科學院生物物理研究所
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00;C30B29/54;C30B7/00;C07K16/40;C07K2/00;C12N15/11
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 余剛;張英

1.一種人源5，10-次甲基四氫葉酸合成酶的晶體，其特征在于所 述晶體的空間群為：C2221，晶胞參數為α＝90.00°，β＝90.00°，γ＝90.00 °。

2.根據權利要求1所述的人源5，10-次甲基四氫葉酸合成酶的晶 體的結晶方法，包括：

將所述人源5，10-次甲基四氫葉酸合成酶的溶液與池液混 合；

利用懸滴法或坐滴法進行結晶；

在1-2天后收集晶體；

其特征在于，所述晶體的生長條件為在5至25攝氏度、 50％至80％的濕度范圍內，池液為：含0.01-0.03mol/L?MgCl₂、 0.01-0.04mol/L?NiCl₂、20％-30％PEG3000至4000、0.1mol/L 的pH＝6.4-7.0的N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸或嗎啉乙磺酸緩 沖液。

3.根據權利要求1所述的人源5，10-次甲基四氫葉酸合成酶的晶 體，其中F55、M58、E61、M90、Y152、Y153位氨基酸與底 物5-甲酰四氫葉酸中的蝶呤基團結合。

4.根據權利要求1所述的人源5，10-次甲基四氫葉酸合成酶的晶 體，其中F85、W109、R148位氨基酸與底物5-甲酰四氫葉酸 中的對氨基苯甲酸基團結合。

5.根據權利要求1所述的人源5，10-次甲基四氫葉酸合成酶的晶 體，其中K10、R14、R145、D154位氨基酸與ATP結合。