[發(fā)明專利]一種枯草芽孢桿菌及其在香蕉組織培養(yǎng)中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910111797.1
• 申請(qǐng)日: 2009-05-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101591629A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-12-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳福如;楊秀娟;杜宜新;甘林;阮宏椿
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12Q1/04;A01H4/00;C12R1/125
• 代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 蔡學(xué)俊

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明技術(shù)領(lǐng)域?qū)儆谵r(nóng)學(xué)門類的植物保護(hù)學(xué)和植物細(xì)胞工程學(xué)；更具體涉及一種枯草芽孢桿菌及其在香蕉組織培養(yǎng)中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

大量使用化學(xué)農(nóng)藥防治植物病害已造成對(duì)環(huán)境和人類健康的危害，利用安全而環(huán)境友好的生物或化學(xué)誘導(dǎo)因子來(lái)激活植物的防御反應(yīng)就是一種有效的策略?？莶菅挎邨U菌(Bacillussubtilis)是一類嗜溫、好氧或兼性厭氧的腐生細(xì)菌，在自然界中分布廣泛，極易分離培養(yǎng)，對(duì)人畜無(wú)害，不污染環(huán)境。能夠產(chǎn)生對(duì)熱、紫外線、電磁輻射有很強(qiáng)抗性的芽孢，耐受各種不良的環(huán)境條件。產(chǎn)生多種抗菌素(如抗真菌肽、脂肽抗生素、小分子的多糖物質(zhì)、大分子的抗菌蛋白)和酶(如蛋白酶、淀粉酶、酯酶、幾丁質(zhì)酶及乙?；被咸擒彰傅燃?xì)胞壁降解酶)，具有廣譜抗菌活性和極強(qiáng)的抗逆能力。對(duì)植物多種病原菌(如香蕉枯萎病菌、小麥白粉病菌，稻瘟病菌、棉花立枯病菌、大豆根腐病菌、番茄灰霉病菌、辣椒炭疽病菌等)產(chǎn)生抑制，目前已經(jīng)在黃瓜、辣椒、香蕉、水稻、小麥、玉米、棉花等農(nóng)作物主要病害上表現(xiàn)出很好的防治效果。

所有的植物具有多種潛在的有效的保護(hù)機(jī)制，誘導(dǎo)抗性(induced?resistance)是指利用物理的、化學(xué)的以及生物的方法，預(yù)先處理植物，誘導(dǎo)植物啟動(dòng)自身的防御機(jī)制，增強(qiáng)對(duì)外界的抵抗能力。誘導(dǎo)抗性也是枯草芽孢桿菌防治植物病害的一種重要機(jī)制，枯草芽孢桿菌能誘導(dǎo)植物體內(nèi)的多種防衛(wèi)反應(yīng)，誘導(dǎo)一些植物防衛(wèi)基因的表達(dá)、增加與抗性有關(guān)保護(hù)酶的活性及植保素、木質(zhì)素、酚類化合物的含量，產(chǎn)生許多新的抗病菌物質(zhì)，從而提高植株對(duì)多種病原菌的系統(tǒng)抗性，這種誘導(dǎo)系統(tǒng)抗性通常具有廣譜性、系統(tǒng)性和非特異性?？莶菅挎邨U菌不僅含有植物生長(zhǎng)素及類似代謝物如細(xì)胞分裂素、玉米素、脫落酸、赤霉酸等，而且還能誘導(dǎo)植物內(nèi)源生長(zhǎng)激素(吲哚乙酸、赤霉素、玉米素)和葉綠素含量增加，促進(jìn)植物生長(zhǎng)，提高植株對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)性和抗逆性?？莶菅挎邨U菌的應(yīng)用很廣泛，國(guó)內(nèi)外在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中多以該菌制成菌劑，以生物農(nóng)藥形式用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，對(duì)農(nóng)業(yè)生態(tài)安全和減少環(huán)境污染起著重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種枯草芽孢桿菌及其在香蕉組織培養(yǎng)中的應(yīng)用，將培養(yǎng)出的枯草芽孢桿菌T122F用于香蕉組織培養(yǎng)中，在材料來(lái)源上經(jīng)濟(jì)方便，技術(shù)上操作簡(jiǎn)便，具有香蕉組培苗生長(zhǎng)安全，出苗快、整齊，育苗時(shí)間短，成本低等優(yōu)點(diǎn)。獲得的香蕉組培苗生長(zhǎng)健壯，根系發(fā)達(dá)，抗毒素、抗病能力強(qiáng)，均可達(dá)到瓶苗假植質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)施本項(xiàng)發(fā)明對(duì)開(kāi)發(fā)一種新型的香蕉組織培養(yǎng)基，對(duì)香蕉種質(zhì)資源抗性改良和創(chuàng)新利用具有重要作用。對(duì)拓展枯草芽孢桿菌在香蕉組織培養(yǎng)中的應(yīng)用新領(lǐng)域和香蕉抗病育種研究新途徑也具有重要的實(shí)踐意義。

本發(fā)明的枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)T122F菌株，其16s?rDNA序列如序列表中SEQ?IDNO.1所示。

本發(fā)明的枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)T122F菌株，已經(jīng)于2009年4月19日保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其簡(jiǎn)稱CGMCC，保藏編號(hào)為：CGMCCNo.3043。

本發(fā)明的枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)T122F菌株形態(tài)學(xué)鑒定：如下表1中所示：

表1?細(xì)胞形態(tài)和生理生化試驗(yàn)結(jié)果

本發(fā)明的枯草芽孢桿菌的選育方法：所述枯草芽孢桿菌T122F菌株從香蕉枯萎病病區(qū)健康香蕉植株體內(nèi)分離篩選獲得。

本發(fā)明的枯草芽孢桿菌T122F菌株用于香蕉組織培養(yǎng)。

本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)為：

本發(fā)明采用選育的一株枯草芽孢桿菌T122F，將該一定濃度枯草芽孢桿菌T122F培養(yǎng)液均勻地添加到香蕉組織培養(yǎng)基(含增殖培養(yǎng)基、分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基)，然后接入相應(yīng)的香蕉培養(yǎng)材料(愈傷組織、叢生芽、分化苗)，使之在含有枯草芽孢桿菌T122F代謝產(chǎn)物的香蕉組織培養(yǎng)基中健康生長(zhǎng)，通過(guò)比較香蕉不同生長(zhǎng)時(shí)期培養(yǎng)材料的生長(zhǎng)情況和抗毒素、抗病性情況之后，發(fā)現(xiàn)使用該技術(shù)可明顯提高香蕉叢生芽增殖和苗分化能力，提高香蕉叢生芽和組培苗的抗毒素、抗病能力，使香蕉植株在組培苗期就可獲得誘導(dǎo)抗性。