[發明專利]一種枯草芽孢桿菌及其在香蕉組織培養中的應用

有效

• 申請號: 200910111797.1
• 申請日: 2009-05-19
• 公開（公告）號: CN101591629A
• 公開（公告）日: 2009-12-02
• 發明（設計）人: 陳福如;楊秀娟;杜宜新;甘林;阮宏椿
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12Q1/04;A01H4/00;C12R1/125
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司
• 代理人: 蔡學俊

1.一種枯草芽孢桿菌，其特征在于：所述枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)T122F菌株，其16srDNA序列如序列表中SEQ?ID?NO.1所示；所述枯草芽孢桿菌T122F菌株的保藏號為CGMCC?No.3043。

2.一種如權利要求1所述的枯草芽孢桿菌的用途，其特征在于：所述枯草芽孢桿菌T122F菌株用于香蕉組織培養。

3.根據權利要求2所述的枯草芽孢桿菌的用途，其特征在于：所述枯草芽孢桿菌T122F菌株在香蕉組織培養中的具體步驟為：

(1)T122F無菌培養液制作：將所述T122F菌株在28℃條件下用常規的細菌NB液體培養基振蕩培養3天，培養液雙層濾紙過濾后，于121℃條件下滅菌20min后備用；

(2)香蕉組織培養基的制作：在MS基礎培養基配方上，配制香蕉叢生芽增殖培養基、叢生芽分化培養基和分生苗生根培養基：所述叢生芽增殖培養基為：MS培養基1000ml+6-芐基氨基嘌呤6-BA?5mg+萘乙酸NAA2mg；所述叢生芽分化培養基為：MS培養基1000ml+6-芐基氨基嘌呤6-BA?3mg+萘乙酸NAA?1mg；所述分生苗生根培養基為：MS培養基500ml+6-糠基氨基嘌呤KT?1mg+萘乙酸NAA?1mg+活性炭粉2g+純水500ml；所述各培養基于121℃條件下滅菌20min后備用；

(3)含T122F培養液的香蕉組織培養基制作：將步驟(1)的T122F菌株培養液按10％的體積比分別添加至50℃的香蕉叢生芽增殖培養基、叢生芽分化培養基和分生苗生根培養基，混勻冷卻后備用；

(4)香蕉組培材料的培養：

步驟1)叢生芽繼代增殖培養：在含T122F菌株培養液的香蕉叢生芽增殖培養基中，每瓶移入香蕉叢生芽組織5塊，于28℃～30℃，光強2000Lx、10h光/14h暗條件下培養；培養12～15天后，叢生芽轉增殖下一代；

步驟2)叢生芽分化培養：取步驟1)的叢生芽，在叢生芽分化培養基中于28℃～30℃，光強2000Lx、10h光/14h暗條件下培養20天后，叢生芽分化成合格苗后移入生根培養基中生根培養；

步驟3)分化苗生根培養：取步驟2)分化苗移入含T122F菌株培養液的香蕉生根培養基中，每瓶移香蕉分化苗8株，于28℃～30℃，光強2000Lx、12h光/12h暗條件下培養，培養20天后，分化苗長出良好的根、莖和葉。

4.根據權利要求3所述的枯草芽孢桿菌的用途，其特征在于：所述步驟(4)中叢生芽繼代增殖培養步驟中，每瓶含培養基30ml，移入香蕉叢生芽10個；所述叢生芽分化培養步驟中，每瓶含培養基30ml移入繼代增殖后的叢生芽10個，所述分化苗生根培養步驟每瓶含培養基30ml。