[發明專利]定量檢測肌氨酸含量的方法及反應試劑盒

有效

• 申請號: 200910107901.X
• 申請日: 2009-06-05
• 公開（公告）號: CN101587076A
• 公開（公告）日: 2009-11-25
• 發明（設計）人: 楊海朋;戈早川
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 深圳中一專利商標事務所
• 代理人: 張全文

1.一種定量檢測肌氨酸含量的方法，包括如下步驟：

S1配制不同濃度的肌氨酸溶液，向溶液中加入堿性緩沖液、肌氨酸氧化酶 催化劑，對甲基酚或對羥基苯乙酸，以及過氧化物酶催化劑，所述堿性緩沖液 將溶液的pH值控制為8～11，所發生的如下化學反應(1)和(2)中肌氨酸、 過氧化氫反應完全：

(1)肌氨酸+氧+水肌氨酸氧化酶過氧化氫+甲醛+甘氨酸；

(2)過氧化氫+對甲基酚過氧化物酶熒光二聚體；或

過氧化氫+對羥基苯乙酸過氧化物酶熒光二聚體；

S2分別測定S1中反應產物熒光二聚體在激發光激發下產生的熒光發射 譜，用熒光發射峰強度數值與肌氨酸的濃度繪制肌氨酸濃度-熒光強度關系曲 線；

S3采用如S1中所述的方法，使未知肌氨酸樣品發生如S1中所述的反應， 測量反應產物的熒光發射譜得到熒光強度數據，對比肌氨酸濃度-熒光強度關系 曲線得出未知肌氨酸樣品含量；

其特征在于：所述S1和S3中下列反應試劑濃度分別為：

2.如權利要求1所述的方法，其中，S2中激發光波長為300～360nm。

3.如權利要求4所述的方法，其中，S2中激發光波長為320nm。

4.如權利要求1項所述的方法，其中，堿性緩沖液為NH₃-NH₄Cl緩沖溶 液、Tris緩沖溶液、硼酸緩沖溶液或磷酸鹽緩沖溶液。

5.一種用于如權利要求1所述方法的反應試劑盒，包含濃度如下的各組分：

6.如權利要求5所述的反應試劑盒，其中，堿性緩沖液為NH₃-NH₄Cl緩 沖溶液、Tris緩沖溶液、硼酸緩沖溶液或磷酸鹽緩沖溶液。