[發明專利]一種純化愛啡肽的方法

有效

• 申請號: 200910104986.6
• 申請日: 2009-01-13
• 公開（公告）號: CN101538314A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發明（設計）人: 劉建;李紅玲;馬亞平;袁建成
• 申請（專利權）人: 深圳市翰宇藥業有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/20;C07K1/18;A61P7/02;A61P9/10
• 代理公司: 深圳市科吉華烽知識產權事務所
• 代理人: 胡吉科

技術領域

本發明屬于HPLC技術領域，尤其是涉及一種規模化純化愛啡肽(Eptifibatide) 的方法。

背景技術

愛啡肽，又名依非巴特、埃替非巴肽，英文名：Eptifibatide，分子式： C₃₅H₄₉N₁₁O₉S₂，CAS登錄號148031-34-9，其結構為

Eptifibatide為抗血小板聚集劑，由美國COR?Therapeutics公司與美國 Schering-Plough公司共同研制開發。1998年7月由Schering-Plough公司以商品 名Intrifiban在美國首次上市，1999年以商品名Intrifiban在歐洲上市。異名 IntrifibanTM，Sch-60936，C68-22，SB-1。

埃替非巴肽為環形肽，是血小板糖蛋白GPIIb/IIIa受體拮抗劑，可阻斷由 各種激活劑引起的血小板聚集反應，是已知最強的特異性血小板聚集抑制劑， 主要用于防止心肌供氧動脈閉塞，心臟病發作，不穩定性心絞痛、無Q波心肌 梗塞、冠脈介入治療引起的猝死。臨床研究結果顯示，病人推注埃替非巴肽進 行治療，在術后48小時，死亡或嚴重問題的聯合終點發生率(主要終點指標包 括：心臟病發作、病死率及需要再次急診介入或溶栓治療率)埃替非巴肽比其 他劑組減少了37％。死亡或心肌梗死發生率，埃替非巴肽組比其他劑組低40％。

Eptifibatide在急性冠脈綜合征病人中呈劑量依賴性地抑制體外血小板的聚 集，在健康志愿者和做PCI術的病人中能抑制纖維原與二磷酸腺苷活化的血小 板結合。對急性冠脈綜合征病人，二磷酸腺苷誘導的血小板聚集早在本品注射 后5分鐘即受到抑制，其在給藥期持續的4～8小時內恢復正常。本品180μg/kg 劑量靜注和以每分鐘2μg/kg速率靜脈輸注均能達到抑制血小板聚焦80％以上。

利用枸櫞酸鹽抗凝劑評價，本品抑制血小板聚焦作用較其它非螯合型抗凝 劑強2-4倍。本品可使急性冠脈綜合征病人及進行PCI術病人的出血時間延長 2-4倍(與其基線值相比)，在停止輸注本品后1小時內恢復正常。本品經大鼠、 兔和猴的安全性評價試驗，未見毒性反應的跡象，給猴連續靜脈輸注28天，每 天劑量高達7.2mg/kg也未見毒性表現。

血小板糖蛋白GPIIb/IIIa受體拮抗劑代表了目前介入性心臟病學最大進展 之一。大規模、隨機、對照臨床試驗已無可爭議地確認了其在心臟病介入治療 中的地位，它可大約減少患者圍手術期缺血并發癥50％～60％，而且，當肝素 使用劑量合適時可不明顯增加出血事件發生率。

Eptifibatide適用于治療急性冠脈綜合征，包括不穩定型心絞痛或無Q波心 肌梗塞(既24小時內胸痛持續發作、心電圖改變和/或心血管系統酶升高)；也 可用于經皮冠脈介入療法，包括血管成形術或動脈粥樣斑塊切除術。一般不用 于無急性冠脈綜合征的血管成形術。在專人監管下，本品可與阿司匹林或肝素 輔用。Eptifibatide的優點：①對血小板糖蛋白IIb/IIIa受體的阻滯是可逆的，一 旦出現不良反應可立即停藥，不良反應輕。②選擇性高，作用強。③本身幾乎 無抗原性，不會引起過敏反應。但在已發表的文獻和專利中，未發現有大規模 生產、并且具有較高收率的純化工藝的報道或申請。

發明內容

本發明的目的在于提供一條適于產業化純化亮丙瑞林的工藝方法，使用反 相高效液相色譜法結合陰離子交換法轉鹽純化愛啡肽，純度高且收率好，達到 產業化要求，解決現有技術存在的缺陷。

為實現上述目的，本發明采取如下技術方案：

一種純化愛啡肽的方法，包括以下步驟：

1)：用裝有硅藻土的布氏漏斗進行抽濾以除去難溶性雜質；

2)：用固定相為烷基硅烷鍵合硅膠，流動相包括A相和B相，所述的A相 為三氟醋酸水溶液、B相為色譜純乙腈，進行梯度洗脫純化；收集目的峰值的肽 溶液減壓旋蒸濃縮；

3)：用陰離子交換法把三氟醋酸鹽轉成醋酸鹽而得到符合要求的醋酸愛啡 肽原料藥。

優選的方案是：所述的步驟1)中裝有硅藻土的厚度為2-3cm。

更為優選的方案是：所述的步驟2)中三氟醋酸水溶液濃度為0.1％；所述 的梯度洗脫的B相為15％～30％；檢測波長為280nm。