[發明專利]一種柑桔碎葉病毒分子變異的快速檢測方法無效
| 申請號： | 200910103937.0 | 申請日： | 2009-05-25 |
| 公開（公告）號： | CN101560577A | 公開（公告）日： | 2009-10-21 |
| 發明（設計）人： | 宋震;周常勇;李中安 | 申請（專利權）人： | 西南大學;中國農業科學院柑桔研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/94 |
| 代理公司： | 重慶弘旭專利代理有限責任公司 | 代理人： | 周韶紅 |
| 地址： | 400716*** | 國省代碼： | 重慶;85 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 柑桔 病毒 分子 變異 快速 檢測 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種柑桔碎葉病毒分子變異的快速檢測方法，其特征在于，用特異性引物對柑桔碎葉病毒基因組特定區域的核酸序列進行逆轉錄聚合酶鏈式擴增，并應用限制性內切酶對其擴增產物進行消化，依據電泳圖譜診斷柑桔碎葉病毒的分子變異，該方法依次包括下述步驟：
(1)取適量柑桔碎葉病毒寄主植物的葉或皮在液氮中充分研磨，加入核酸提取液按常規方法提取樣品總核酸或RNA；
(2)根據柑桔碎葉病毒的保守序列設計特異引物CTLVR：5′-AGAGTGGACAAACTCTAGAC-3′，CTLVF：5′-CCCTCTCAGC?TAGAATTGAA-3′，以所提取的核酸為模版，對柑桔碎葉病毒基因組特定區域進行逆轉錄聚合酶鏈式擴增；
(3)應用限制性內切酶對柑桔碎葉病毒的RT-PCR產物進行消化；
(4)瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰氨凝膠電泳、染色、獲取電泳圖譜；
(5)依據上述圖譜的條帶特征診斷柑桔碎葉病毒的分子變異類型。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)所述的柑桔碎葉病毒基因組特定區域是指包含或部分包含外殼蛋白基因、運動蛋白基因或其它基因的核酸序列。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟(3)所述的限制性內切酶是指Taq?I、Mse?I、HinfI或其它限制性內切酶中的1種或2種。
下載完整專利技術內容需要扣除積分，VIP會員可以免費下載。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于西南大學;中國農業科學院柑桔研究所，未經西南大學;中國農業科學院柑桔研究所許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/200910103937.0/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
