[發明專利]一種注射劑中致熱物質含量的全熱原檢測方法

無效

• 申請號: 200910103006.0
• 申請日: 2009-01-05
• 公開（公告）號: CN101477103A
• 公開（公告）日: 2009-07-08
• 發明（設計）人: 范能全;羅毅平;彭蘭
• 申請（專利權）人: 范能全
• 主分類號: G01N33/15
• 分類號: G01N33/15;G01N33/50;C12Q1/02
• 代理公司: 重慶創新專利商標代理有限公司
• 代理人: 宮兆斌

技術領域

本發明涉及一種生物醫藥檢測技術，特別涉及一種注射劑中致熱 物質含量的全熱原檢測方法。

背景技術

自100多年前出現注射用藥至今，非腸道使用醫用制品中的熱原 對人體的危害即熱原反應已經為人所共知，臨床上主要表現為如下癥狀：發熱、 寒顫、惡心、嘔吐、頭痛、腰及關節痛，膚色灰白，白細胞下降，血管通透性 增強，嚴重者造成昏迷甚至休克、死亡。因此，凡是非腸道使用制品包括藥品、 生物制品和醫療器械裝置都應進行熱原檢查，有效地對其熱原進行控制和檢查 是臨床上安全使用的重要保證。

熱原是指能夠導致機體發熱的物質，主要分為內源性和外源性兩大類。發熱 機理是外源性熱原通過刺激哺乳動物體內的免疫細胞分泌細胞因子產生內源性 熱原，從而引起機體發熱。熱原檢測的目的主要是對外源性的熱原進行總量控 制，使其對機體不產生危害性的影響。

目前的熱原檢測方法主要有家兔檢查法、細菌內毒素檢查法和體外熱原實驗 法。其中前兩種方法已經收錄進入了2005版《中國藥典》，是國家法定的檢測 方法。

家兔檢查法的優點是能夠真實反映外源性熱原引起哺乳動物復雜升溫反應 過程，用于評價藥品中總的致熱物質。其缺點是：(1)由于我國目前的家兔繁 育、飼養管理等一系列問題，使得家兔種屬差異和個體差異較大，造成重復性 較差，而且家兔和人發熱的情況并不完全一致；(2)靈敏度低，容易造成檢測 結果的假陰性；(3)對某些能影響家兔正常生理尤其是體溫的制品如細胞因子、 病毒制品、抗生素、致瀉藥、某些鎮靜劑、止痛劑、胞質蛋白和放射性藥物等 也不可能進行正常檢測；(4)試驗費用及日常維護成本較高，且檢測時間長(一 般為5個小時)，特別是當熱原含量嚴重超標而出現毒性時，家兔體溫下降，也 不能正確反映結果。現目前全部中藥注射劑、生物制品類注射劑及部分對細菌 內毒素檢查有干擾的化學注射藥品采用的是家兔檢查法。

細菌內毒素檢查法是以節肢動物鱟的血細胞溶解物與微量細菌內毒素產生 凝集反應為基礎的。自1968年由Liven和Bang建立了細菌內毒素檢查法以來， 在大部分的注射化學藥品和抗生素藥品中應用廣泛。其優點是快速、簡便、可 定量、可標準化、相對兔法而言檢測費用較低。缺點主要是：(1)該方法只能 特異性地檢查革蘭氏陰性菌的內毒素，對其他熱原質表現為陰性，且易受到多 種物質的干擾，不能完全反映藥品中所含的熱原物質；(2)細菌內毒素檢查法 不能完全反映哺乳動物對熱原的反應過程，因為來自不同細菌的內毒素對哺乳 動物致熱活性差別很大，從沒有致熱性到有很強的致熱性，這種差異與其凝集 活性的差異沒有相關性，故該法實際能夠檢測到的僅僅是內毒素對鱟血細胞的 凝集活性，而不是內毒素對人體的發熱活性或化學概念上的含量；(3)該方法 對一些酶抑制劑、鈣鎂離子鰲合劑和多聚核苷酸和中藥注射劑等很難進行檢測； (4)研究發現，某些生物制品和抗生素與內毒素之間還存在協同作用，而這種 協同作用是細菌內毒素檢查法無法檢測到的；(5)該法是檢測內毒素的靈敏方 法，其應用的前提是必須確定藥品內的熱原物質主要是內毒素，其他致熱物質 如抗原或半抗原性不是主要致熱物質，并需排除干擾和協同發熱的可能，而我 們都知道藥品中的熱原的種類繁多，而內毒素只是熱原中的一類，現在為了細 菌內毒素的檢測的方便而人為地將內毒素等同于熱原來看待；(6)鱟作為一種 遠古生物，因不合理利用使其瀕臨滅絕，現目前也急需尋找能完全替代它的檢 測方法。