[發明專利]一種注射劑中致熱物質含量的全熱原檢測方法

無效

• 申請號: 200910103006.0
• 申請日: 2009-01-05
• 公開（公告）號: CN101477103A
• 公開（公告）日: 2009-07-08
• 發明（設計）人: 范能全;羅毅平;彭蘭
• 申請（專利權）人: 范能全
• 主分類號: G01N33/15
• 分類號: G01N33/15;G01N33/50;C12Q1/02
• 代理公司: 重慶創新專利商標代理有限公司
• 代理人: 宮兆斌

1.一種注射劑中致熱物質含量的全熱原檢測方法，其特征在于包括以下步 驟：

a)、制備人全血試驗液

將采集而來的體外人全血經過阿氏液作抗凝處理后，再將經過阿氏液作抗 凝處理后的體外人全血用生理鹽水0.9％氯化鈉注射液稀釋成為體積比濃度為2 ％v/v，的人全血試驗液；

b)、將細菌內毒素工作標準品用生理鹽水0.9％氯化鈉注射液稀釋后進行線 性考察，做出標準曲線

將細菌內毒素工作標準品用生理鹽水0.9％氯化鈉注射液稀釋成100EU/ml、 10EU/ml、1EU/ml、0.1EU/ml、0.01EU/ml，分別取各級標準品稀釋液0.1ml和 步驟a中的人全血試驗液1.5ml到耗氧測定儀的呼吸室內，呼吸室溫度恒定在 37.5±0.1℃，混勻速度控制為80轉/分鐘，待平衡后分別進行檢測，以處理濃 度為橫坐標、耗氧水平為縱坐標，根據實驗得到的數據繪制標準曲線，當相關 系數|r|＞0.980，變異系數CV＜10％，表明試驗條件符合要求；

c)、選擇適宜的注射劑稀釋濃度

將注射劑樣品用生理鹽水0.9％氯化鈉注射液稀釋成注射劑樣品原液的濃度， 再從原液濃度開始進行倍半稀釋，即用生理鹽水0.9％氯化鈉注射液稀釋至2、4、 8、16、32、64倍，分別向各級樣品稀釋液中等量添加1EU/ml的細菌內毒素工 作標準品稀釋液，分別計算其回收率R，當50％≤R≤200％時，該濃度的樣品 稀釋液符合下一步檢測的要求，可以進行致熱物質的含量檢測；R越接近100％ 時，檢測效果越好，選擇R最接近100％的樣品稀釋液進行致熱物質的含量檢測；

d)、注射劑樣品中致熱物質含量的確定

根據步驟c的試驗結果所得到的樣品試驗液濃度作為樣品檢查濃度，以生 理鹽水0.9％氯化鈉注射液作為空白對照，分別加入耗氧測定儀進行檢測，然后 將扣除空白對照后的試驗結果按稀釋步驟進行計算后就得到該注射劑樣品中致 熱物質的含量；

e)、注射劑樣品中所含的致熱物質是否超標的判定

將該注射劑樣品中所含的致熱物質的含量和熱原物質的具體標準規定進行 比較，從而判定該注射劑樣品中所含的致熱物質是否超標，最終得到該注射劑 樣品熱原的安全性質量檢查是否合格的結論。

2.根據權利要求1所述一種注射劑中致熱物質含量的全熱原檢測方法，其 特征在于：所述的步驟c中將注射劑樣品用生理鹽水0.9％氯化鈉注射液稀釋成 注射劑樣品原液的濃度；

對注射用的粉針和凍干劑根據其具體的內包裝規格進行稀釋，即凍干劑的 內包裝是5ml規格的西林瓶，則加生理鹽水0.9％氯化鈉注射液2～5ml進行稀釋， 然后將稀釋液作為樣品原液；

對于水針劑而言，則將其直接作為樣品的原液；以此為最高濃度依次進行 稀釋，找到回收率R最接近100％的樣品稀釋液作為最終正式的實驗濃度進行檢 查。