[發明專利]高產聚-β-羥丁酸的巨大芽孢桿菌Bm-10菌株及其篩選方法和應用

有效

• 申請號: 200910102277.4
• 申請日: 2009-09-10
• 公開（公告）號: CN101921714A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發明（設計）人: 蔣冬花;周琴
• 申請（專利權）人: 浙江師范大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12Q1/04;C12P7/62;C12R1/11
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務所有限公司 33214
• 代理人: 王從友

1.高產聚-β-羥丁酸的巨大芽孢桿菌Bm-10菌株，其特征在于：高產聚-β-羥丁酸的巨大芽孢桿菌Bm-10菌株的保藏號為：CCTCC?NO：M209131。

2.根據權利要求1所述的高產聚-β-羥丁酸的巨大芽孢桿菌Bm-10菌株其特征在于：該菌株菌落乳白色不透明，圓形，較大、直徑約3～6mm，表面光滑，邊緣整齊，無特殊氣味；顯微鏡觀察細胞呈桿狀或近橢圓形桿狀，粗大，長度約3～5μm，寬度約1.2～1.5μm；趨于扭曲的短鏈；周生鞭毛，具運動性；革蘭氏染色陽性；16S?rDNA電泳和測序分析結果表明，其長度為1513bp。

3.根據權利要求1所述的高產聚-β-羥丁酸的巨大芽孢桿菌Bm-10菌株的篩選方法，其特征在于該方法如下：取0.2g土壤，加入5mL蒸餾水，85℃加熱15min，進行10^-1～10^-4梯度稀釋，選擇10^-2濃度100μL涂布牛肉膏蛋白胨培養基平板，30℃培養24h，出現圓形乳白色菌落；挑取單菌落，進一步分離、純化后，獲得菌株。

4.根據權利要求3所述的高產聚-β-羥丁酸的巨大芽孢桿菌Bm-10菌株的篩選方法，其特征在于：牛肉膏蛋白胨培養基的配方包括牛肉膏20g、蛋白胨5g、氯化鈉5g、水1L，pH?7.2。

5.根據權利要求1所述的高產聚-β-羥丁酸的巨大芽孢桿菌Bm-10菌株用于聚-β-羥丁酸的制備。

6.根據權利要求1所述的高產聚-β-羥丁酸的巨大芽孢桿菌Bm-10菌株用于聚-β-羥丁酸的制備方法，其特征在于該方法包括以下的步驟：

①挑取適量菌種接入牛肉膏蛋白胨培養液中，30℃活化培養20～30h；裝入牛肉膏蛋白胨培養液，取培養的種子培養液，按4～10％的接種量接種后，30℃，200r/min，搖瓶培養80～120h，可得PHB含量占菌體干重的45％～55％的巨大芽孢桿菌菌體；

②將搖瓶所得培養液10000r/min離心5min，收集菌體，無菌水洗滌3次后再用丙酮洗滌一次，之后加氯仿與酒精的混合液提取PHB，然后40℃干燥后可得到白色沉淀即為PHB。