[發明專利]一種全液相依替巴肽(Eptifibatide)的合成方法

無效

• 申請號: 200910101674.X
• 申請日: 2009-08-21
• 公開（公告）號: CN101993475A
• 公開（公告）日: 2011-03-30
• 發明（設計）人: 阮小麗
• 申請（專利權）人: 杭州諾泰制藥技術有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/06;C07K1/02;A61P9/10;A61P7/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域該發明名稱是‘一種全液相依替巴肽(Eptifibatide)的合成方法’，屬于生物化學技術領域，涉及應用金屬化合物絡合催化得到二肽偶聯物后液相合成依替巴肽(Eptifibatide)的反應流程。

背景技術依替巴肽，英文名為Eptifibatide，分子式為C₃₅H₄₉N₁₁O₉S₂，分子結構式為：

該多肽是具特異針對性的血小板糖蛋白IIb/IIIa受體拮抗劑，為美國注冊藥物INTERGRILIN的主要成份，用于治療急性冠狀動脈粥樣硬化以及栓塞等疾病。中國專利02145292.X號公開了液相與固相結合的2+5合成策略合成依替巴肽(Eptifibatide)的方法，其中五肽系列Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH₂在Rink?AM樹脂上合成，主要用脲鹽作為聚合劑；Mpa-hArg片斷應用DCC催化的液相胍基化反應來合成；七肽環合在空氣氧化的條件下完成。該策略的長處在于避免了使用BOC固相反應策略，特別是HF裂解反應；另外，固相反應在生產上也相對比較省時。上專利并描述了瑞士Bachem公司所采用的3+3+1合成策略，其片斷包括：Mpa(Trt)-Har-Gly-OH，從Mpa(Trt)-Lys(Tfa)-Gly-OMe胍基化與皂化后得到；Z-Asp(OtBu)-OH與Trp-Pro-OMe聚合后得到Z-Asp(OtBu)-Trp-Pro-OMe，經催化氫化以及皂化后得到Asp-Trp-Pro-OH；Mpa(Trt)-Har-Gly-OH與Asp-Trp-Pro-OH聚合后得化合物Mpa(Trt)-hArg-Gly-Asp(OtBu)-Trp-Pro-OH，該化合物隨之與Cys(Trt)-NH₂聚合后得Mpa(Trt)-Har-Gly-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys-NH₂，該化合物經去保護基反應，氧化成環，進一步去保護基后得依替巴肽(Eptifibatide)。上專利并聲明Bachem同時還采用了BOC固相合成策略，按次將Boc-Cys(OmeBzl)-OH，Boc-Pro-OH，Boc-Trp-OH，Boc-Asp(OcHx)-OH，BOC-Gly-OH和Boc-Lys-(Fmoc)-OH連到樹脂上，接著去Boc保護基，用3，5-二甲基吡唑甲脒胍基化后取得Boc-Har-Gly-Asp(OcHx)-Trp-Pro-Cys(OMeBzL)-樹脂，去BOC保護后該六肽樹脂與S-BzL(OMe)-Mpa聚合得S-Bzl(OMe)-Mpa-Har-Gly-Asp(OcHx)-Trp-Pro-Cys(OMeBzL)-樹脂，該粗產品經去保護基反應后，于樹脂上氧化得雙硫鍵成環，用HF裂解純化后得依替巴肽(Eptifibatide)。美國專利申請號2006/0036071記錄了另一依替巴肽(Eptifibatide)的合成方法，其中氨基端保護的高精氨酸與甘氨酸聚合后得P1-hArg-Gly-OH；羧基上保護的天冬氨酸與Trp-Pro二肽片斷縮合得三肽P₃-Asp(O-P₂)-Trp-Pro-OH；以上兩個片斷然后聚合得五肽P₁-Har-Gly-Asp(O-P₂)-Trp-Pro-OH；該五肽在與半胱氨酸聚合后得P₁-Har-Gly-Asp(O-P₂)-Trp-Pro-Cys-NH₂；該六肽通過一二硫鍵與巰基丙酸結合，去P1保護基后高精氨酸的N端與巰基丙酸的羧端偶合后得依替巴肽(Eptifibatide)。

發明內容該發明的目的是公開一種全液相合成依替巴肽(Eptifibatide)的方法，以調整目前依替巴肽(Eptifibatide)制備多依靠固相合成，樹酯成本較高的情況；該發明的另一目的是公開一二肽胍基化的方法，以降低依替巴肽(Eptifibatide)合成中氨基酸的成本。

本發明的方法包括以下步驟：

(1).本發明于液相中以過渡金屬鹽絡合催化胍基化制備了Trt-Mpa-Harg(Boc)₂-OH；