[發明專利]用于熒光定量PCR法檢測腸道光滑念珠菌的試劑盒有效
| 申請號： | 200910098557.2 | 申請日： | 2009-05-14 |
| 公開（公告）號： | CN101555524A | 公開（公告）日： | 2009-10-14 |
| 發明（設計）人： | 李蘭娟;陳瑜;郭仁勇;魯海峰;陳珍晶 | 申請（專利權）人： | 浙江大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;G01N21/64;C12R1/72 |
| 代理公司： | 杭州中成專利事務所有限公司 | 代理人： | 唐銀益 |
| 地址： | 310027浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 熒光 定量 pcr 檢測 腸道 光滑 念珠菌 試劑盒 | ||
【權利要求書】：
1.一種用于熒光定量PCR法檢測腸道光滑念珠菌的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括：
反應總體積1/10的10×Taqman?PCR?buffer；
各0.15μmol/L～1μmol/L的上游和下游引物；
各200μmol/L的dATP、dTTP、dGTP、dCTP；
2.0mmol/L～3.5mmol/L的MgCl2；
0.05U/μl?HOTSTART?Taq?DNA聚合酶；
0.02×SYBR?green?I熒光染料；
標準陽性模版，其濃度按定量標準曲線制備的要求系列稀釋；
余量為無菌雙蒸水；
所述兩條引物為PCR擴增過程中使用的特異性擴增光滑念珠菌ITS區的引物，其中：
上游引物序列為：5’-CCCACATACTGATATGGCATACAA-3’；
下游引物序列為：5’-TTATCACACCACTCGACACT-3’；
所述標準陽性模版為光滑念珠菌標準菌株DNA經前述引物擴增，擴增產物與pGEMT-T?Easy載體連接后獲得的標準質粒DNA；擴增產物的序列與SEQ?ID?NO：3所示的核苷酸序列一致。
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