[發(fā)明專利]檢測志賀氏菌的酶免疫傳感器及其制備方法和運(yùn)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910097577.8
• 申請日: 2009-04-16
• 公開（公告）號: CN101532980A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙廣英;詹學(xué)佳
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工商大學(xué)
• 主分類號: G01N27/333
• 分類號: G01N27/333;G01N33/569;G01N27/48
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務(wù)所有限公司
• 代理人: 徐關(guān)壽

1.檢測志賀氏菌的酶免疫傳感器，其特征是包括絲網(wǎng)印刷電極，所述絲網(wǎng)印刷電極的工作電極上涂布有包埋“酶標(biāo)記志賀氏菌抗體-碳納米管-殼聚糖”混合物的敏感膜；所述的酶標(biāo)記志賀氏菌抗體為辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、乳酸脫氧酶、葡萄糖氧化酶、青霉素?；?、尿素水解酶標(biāo)記的志賀氏菌抗體中的一種或它們的混合物。

2.如權(quán)利要求1所述檢測志賀氏菌的酶免疫傳感器，其特征是所述的碳納米管為多壁碳納米管。

3.如權(quán)利要求2所述檢測志賀氏菌的酶免疫傳感器，其特征是所述的志賀氏菌為福氏志賀氏菌。

4.制備權(quán)利要求1所述酶免疫傳感器的方法，其特征是包括以下步驟：

1)??將碳納米管超聲分散在殼聚糖溶膠中，得均一的碳納米管-殼聚糖復(fù)合物；

2)??將酶標(biāo)記志賀氏菌抗體與碳納米管-殼聚糖復(fù)合物充分混合均勻，4?^oC放置12?h，制得“酶標(biāo)記志賀氏菌抗體-碳納米管-殼聚糖”混合物；所述的酶標(biāo)記志賀氏菌抗體為辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、乳酸脫氧酶、葡萄糖氧化酶、青霉素酰化酶、尿素水解酶標(biāo)記的志賀氏菌抗體中的一種或它們的混合物；

3)?將“酶標(biāo)記志賀氏菌抗體-碳納米管-殼聚糖”混合物涂布在絲網(wǎng)印刷電極的工作電極表面，室溫下干燥成膜；

4)?涂膜后的電極浸泡于含0.2%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩沖溶液中，4?^oC下放置1?h。

5.檢測志賀氏菌的方法，其特征是包括以下步驟：

1）待測樣本滴于如權(quán)利要求1所述酶免疫傳感器的工作電極表面，28?^oC孵育30?min；

2）免疫傳感器置于電解池中，電解池的檢測底液為含有0.6?mmol/L?H₂O₂和1.0?mmol/L?硫堇的醋酸鹽緩沖液，pH值為7.0；

3）設(shè)定適宜的掃描參數(shù)，對工作電極施加電壓，檢測輔助電極與工作電極間的電流值；

4）測定獲得的電流信息輸入數(shù)據(jù)采集與處理系統(tǒng)；

5)?信息處理結(jié)果輸出。

6.如權(quán)利要求5所述的檢測志賀氏菌的方法，其特征在于數(shù)據(jù)采集與處理系統(tǒng)采用循環(huán)伏安法作為免疫電極表征、定性判定和定量檢測的方法。