[發(fā)明專利]海雀稗耐寒體細胞突變體篩選方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910097362.6 | 申請日： | 2009-04-13 |
| 公開（公告）號： | CN101558737A | 公開（公告）日： | 2009-10-21 |
| 發(fā)明（設計）人： | 葉曉青;梁流芳;佘建明;張旭;董民強;王松鳳;吳瑛瑛;倪萬潮;楊莉林;吳小明 | 申請（專利權）人： | 浙江紹興白云建設有限公司;江蘇省農(nóng)業(yè)科學院;杭州白云草業(yè)研究所有限公司 |
| 主分類號： | A01H1/04 | 分類號： | A01H1/04;A01H4/00 |
| 代理公司： | 浙江翔隆專利事務所 | 代理人： | 胡龍祥 |
| 地址： | 312500浙江省*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 海雀稗 耐寒 體細胞 突變體 篩選 方法 | ||
1、海雀稗耐寒體細胞突變體篩選方法，其特征是：
1)材料
選用海雀稗的顆粒狀胚性愈傷組織為材料，0℃為低溫篩選壓；
2)培養(yǎng)基
基本培養(yǎng)基由MS大量元素、MS微量元素與B5維生素組成，添加蔗糖30g/L；
愈傷組織繼代培養(yǎng)基是在基本培養(yǎng)基中附加以下激素組成：2，4-二氯苯氧乙酸2.0mg/L，6-芐基氨基嘌呤0.05mg/L，瓊脂條16g/L；
愈傷組織分化培養(yǎng)基是在基本培養(yǎng)基中附加以下激素組成：6-芐基氨基嘌呤2.0mg/L，瓊脂條8g/L；
上述培養(yǎng)基在高壓滅菌前用氫氧化鈉和鹽酸調(diào)整pH值至5.8；
3)方法
將顆粒狀胚性愈傷組織在愈傷組織繼代培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)，用作低溫處理材料；冰箱溫度設置為0℃，培養(yǎng)時間為60d；經(jīng)過低溫培養(yǎng)和篩選的愈傷組織轉(zhuǎn)移到愈傷組織分化培養(yǎng)基上形成綠苗；綠苗再轉(zhuǎn)移到愈傷組織分化培養(yǎng)基上，發(fā)育成具有根、莖、葉的完整再生植株。
2、根據(jù)權利要求1所述的海雀稗耐寒體細胞突變體篩選方法，其特征是所述的愈傷組織繼代培養(yǎng)在散射光下進行。
3、根據(jù)權利要求1所述的海雀稗耐寒體細胞突變體篩選方法，其特征是所述的愈傷組織低溫培養(yǎng)在無光源的冰箱內(nèi)進行。
4、根據(jù)權利要求1所述的海雀稗耐寒體細胞突變體篩選方法，其特征是所述的愈傷組織分化在光照條件下進行。
5、根據(jù)權利要求1所述的海雀稗耐寒體細胞突變體篩選方法，其特征是所述的培養(yǎng)室溫度為26±2℃，光照強度為1500lx，光照時間為16h/d。
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