[發(fā)明專(zhuān)利]一種小桐子毒蛋白的連續(xù)化提取方法無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200910094015.8 | 申請(qǐng)日： | 2009-01-08 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN101463073A | 公開(kāi)（公告）日： | 2009-06-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 鄧欣;方真;楊成源;張紹志;劉云虎 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 中國(guó)科學(xué)院西雙版納熱帶植物園 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C07K1/36 | 分類(lèi)號(hào)： | C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C11B3/00;C11B1/00 |
| 代理公司： | 云南協(xié)立專(zhuān)利事務(wù)所 | 代理人： | 謝 嘉 |
| 地址： | 650223云南省昆明*** | 國(guó)省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 桐子 蛋白 連續(xù) 提取 方法 | ||
1.一種小桐子毒蛋白的連續(xù)化提取方法，其特征在于：具體包括以下步驟：
(1)粉碎：小桐子種子經(jīng)粗破后，將種仁粉碎至粒度200～1000目；
(2)超聲提取：將粉碎好的種仁粉末與濃度0.1～1mol/L的磷酸鹽緩沖液以體積比1∶5～1∶20均勻混合后超聲提取，超聲頻率20～80KHz，超聲時(shí)間20～60min，攪拌速率0～500rpm；
(3)離心分離脫脂：將提取液輸送到離心機(jī)，離心速率1000～4000rpm，離心10～30min，將油脂層轉(zhuǎn)入油脂貯存罐，分離上清液和沉淀物；
(4)等電點(diǎn)沉淀：上清液中加入濃度0.1～1mol/L的磷酸鹽緩沖液，調(diào)節(jié)上清液pH值為7.0～9.0，沉降10～24h，膜分離脫鹽，得粗蛋白濃縮液；
(5)膜分離純化：先采用截流分子量4萬(wàn)的生物膜除去4萬(wàn)以上的大分子蛋白，再使用截流分子量1萬(wàn)的生物膜除去1萬(wàn)以下的蛋白質(zhì)，超濾壓力差0.2～0.6MPa，料液濃度2～8％，得濃縮液；
(6)所得濃縮液再重復(fù)步驟(4)和(5)，經(jīng)等電點(diǎn)沉淀和膜分離純化后得到高純度毒蛋白溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小桐子毒蛋白連續(xù)化提取方法，其特征在于，步驟(3)中，離心分離得到的沉淀物再次進(jìn)行超聲提取和離心分離脫脂，所得到的上清液和沉淀物分別與第一次分離得到的上清液和沉淀物合并。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于：所述的沉淀物以丙酮為溶劑，經(jīng)超聲波提取得到小桐子油。
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