[發明專利]提取純化DNA的試劑

有效

• 申請號: 200910090335.6
• 申請日: 2009-08-05
• 公開（公告）號: CN101613696A
• 公開（公告）日: 2009-12-30
• 發明（設計）人: 趙興春;葉健;姜伯瑋
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C07H21/04
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 關 暢;任鳳華

1.一種提取純化DNA的試劑，由以下物質組成：

預處理裂解液：pH為7.4-8.5，溶劑是水，溶質是如下終濃度的物質：10-100mM緩沖鹽，0.5-5g/100ml的陰離子表面活性劑，1-100mM的螯合劑，50-150mM的可溶性鹽和0.2-4mg/ml的蛋白酶K；

裂解結合液：pH＝6.4-7.4，溶劑是水，溶質是如下終濃度的物質：20-150mM的緩沖鹽，3-8M的Chaotropic鹽，1-10％(體積百分比)的非離子表面活性劑，0.5-4g/100ml的兼性離子去污劑，10-100mM的螯合劑以及15-30％(體積百分含量)的醇；

洗滌液I：溶劑是水，溶質是如下終濃度的物質：4-6M的Chaotropic鹽，25-50％(體積百分含量)的醇和10-100mM的螯合劑；

洗滌液II：75-80％(體積百分含量)乙醇水溶液；

洗脫液：是TE溶液，所述TE溶液的pH為8.0，溶劑是水，溶質是0-20mM的Tris-HCl，0-2mM的EDTA；

磁珠懸浮液：每ml磁珠懸浮液的成分如下：直徑為50-1200nm的納米級硅包被磁性微球50-100mg，其余為水。

2.一種提取純化DNA的試劑，由以下物質組成：

預處理裂解液：pH為7.4-8.5，溶劑是水，溶質是如下終濃度的物質：10-100mM緩沖鹽，0.5-5g/100ml的陰離子表面活性劑，1-100mM的螯合劑，50-150mM的可溶性鹽和0.2-4mg/ml的蛋白酶K和0.025-0.05M的二硫蘇糖醇；

裂解結合液：pH＝6.4-7.4，溶劑是水，溶質是如下終濃度的物質：20-150mM的緩沖鹽，3-8M的Chaotropic鹽，1-10％(體積百分比)的非離子表面活性劑，0.5-4g/100ml的兼性離子去污劑，10-100mM的螯合劑以及15-30％(體積百分含量)的醇；

洗滌液I：溶劑是水，溶質是如下終濃度的物質：4-6M的Chaotropic鹽，25-50％(體積百分含量)的醇和10-100mM的螯合劑；

洗滌液II：75-80％(體積百分含量)乙醇水溶液；

洗脫液：是TE溶液，所述TE溶液的pH為8.0，溶劑是水，溶質是0-20mM的Tris-HCl，0-2mM的EDTA；

磁珠懸浮液：每ml磁珠懸浮液的成分如下：直徑為50-1200nm的納米級硅包被磁性微球50-100mg，其余為水。

3.根據權利要求1或2所述的試劑，其特征在于：所述預處理裂解液中，緩沖鹽的濃度為20-80mM，陰離子表面活性劑的濃度為0.5-4g/100ml，螯合劑的濃度為20-80mM，可溶性鹽的濃度為50-130mM，蛋白酶K的濃度為0.2-2mg/ml；所述陰離子表面活性劑為十二烷基磺酸鈉或十二烷基肌氨酸鈉；所述可溶性鹽溶液為NaCl水溶液。

4.根據權利要求3所述的試劑，其特征在于：所述可溶性鹽的濃度為80-100mM；蛋白酶K的濃度為0.2-1mg/ml。

5.根據權利要求1或2所述的試劑，其特征在于：所述裂解結合液中，Chaotropic鹽的濃度為4-6M，緩沖鹽的濃度為50-120mM，螯合劑的濃度為20-80mM，非離子表面活性劑的濃度為2-8％(體積百分比)，兼性離子去污劑的濃度為1-3g/100ml，醇的濃度為20-28％(體積百分含量)；所述非離子表面活性劑為Triton?X-100、Tween20、Tween?21、Tween.40、Tween?60、Tween?80、Tween?85、NP-40、Brij?30或Span?20；所述兼性離子去污劑是3-(3-膽胺丙基)-二甲氨基-1-丙磺酸；所述醇是乙醇、異丙醇或聚乙二醇。