[發(fā)明專利]環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)(LAMP)檢測鼠疫桿菌的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910090037.7
• 申請日: 2009-07-29
• 公開（公告）號: CN101665832A
• 公開（公告）日: 2010-03-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王靜;文海燕;龍冬伶;孫肖紅;楊宇;張曉龍;姚李四
• 申請（專利權(quán)）人: 中國檢驗檢疫科學(xué)研究院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12R1/01
• 代理公司: 北京中創(chuàng)陽光知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 尹振啟

1.環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)(LAMP)檢測鼠疫桿菌的非診斷性方法，其 中包括：

(1)鼠疫桿菌疫苗株EV76?DNA的提取；

(2)LAMP引物設(shè)計和合成，其中LAMP引物包括兩個外引物和 兩個內(nèi)引物，內(nèi)引物FIP(上端內(nèi)引物)包含F(xiàn)lc序列和F2(F2c區(qū)域 的互補(bǔ)序列)，即5，-Flc-F2；內(nèi)引物BIP(下端內(nèi)引物)包含Blc(Bl 區(qū)域的互補(bǔ)序列)和B2序列，即5，-Blc-B2，外引物為F3和B3 序列，能特異結(jié)合靶序列上的6個特異區(qū)域；

(3)在所選酶濃度、Mg2+條件、dNTPs濃度、反應(yīng)溫度條件下 進(jìn)行反應(yīng)；其中，所述LAMP引物設(shè)計為下列引物YP2088

該序列根據(jù)鼠疫桿菌YP2088基因設(shè)計的引物，用于引物設(shè)計的 序列區(qū)域用箭頭表示，兩端的數(shù)字為對應(yīng)的YP2088的位置。

2.權(quán)利要求1所述的非診斷性方法，其中，對于YP2088引物，外引 物∶內(nèi)引物＝比例范圍為1∶6-1∶10。

3.權(quán)利要求2所述的非診斷性方法，其中外引物∶內(nèi)引物＝1∶7-1∶ 9。

4.權(quán)利要求3所述的非診斷性方法，其中，外引物∶內(nèi)引物＝1∶8。