[發明專利]檢測頭孢類藥物的酶聯免疫試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 200910085945.7
• 申請日: 2009-06-01
• 公開（公告）號: CN101571539A
• 公開（公告）日: 2009-11-04
• 發明（設計）人: 何方洋;張建軍;馮才偉;萬宇平;馮靜;馮才茂;崔海峰;徐念琴;趙正苗;李勇;劉福林;劉平;朱亮亮;陳煒琳;羅貴昆
• 申請（專利權）人: 北京望爾康泰生物技術有限公司;北京望爾生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/566;G01N33/531;G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測頭孢類藥物的酶聯免疫試劑盒，其特征在于它含有：

(1)包被有包被原的酶標板；

(2)酶標記物；

(3)頭孢噻呋標準品溶液；

(4)底物顯色液；

(5)終止液；

(6)濃縮洗滌液；

(7)濃縮復溶液，

所述包被原為頭孢類藥物抗原、抗體或抗抗體，所述酶標記物為酶標記頭 孢類藥物抗原、酶標記頭孢類藥物抗體或酶標記抗抗體，

當酶標板上包被抗原且酶標記物為酶標記抗抗體或酶標板上包被抗抗體且 酶標記物為酶標記抗原時還含有頭孢類藥物特異性抗體工作液，

所述頭孢類藥物抗體為單克隆抗體，由雜交瘤細胞株C-4-3CGMCC?No.3111 分泌產生。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述頭孢類藥物抗原是由頭孢 類藥物半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述頭孢類藥物抗體是由所述抗原制備獲 得，所述頭孢類藥物半抗原是通過頭孢噻呋和6-氨基正己酸反應得到的頭孢噻 呋正己酸酯半抗原。

3.如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于所述載體蛋白為鼠血清蛋白、 甲狀腺蛋白、牛血清蛋白、兔血清蛋白、人血清蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白或 纖維蛋白原。

4.如權利要求書1或2所述的試劑盒，其特征在于所用包被緩沖液為pH 9.4-9.7，0.1-0.3mol/L碳酸鹽緩沖液，所用封閉液為含有8-10％卵清蛋白、0.1-0.3％ 吐溫-20和4-7％蔗糖的pH值為8.9-9.4的0.02-0.03mol/L的碳酸鹽緩沖液，所述 百分比為重量百分比。

5.如權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于所述酶標記物的標記酶為 辣根過氧化物酶或細菌提取堿性磷酸酯酶，當標記酶為辣根過氧化物酶時，底 物顯色液A液為過氧化氫或過氧化脲，底物顯色液B液為鄰苯二胺或四甲基聯 苯胺，終止液為1～2mol/L的硫酸或鹽酸緩沖液；當標記酶為細菌提取堿性磷酸 酯酶時，底物顯色液為對硝基磷酸鹽緩沖液、終止液為1～2mol/L氫氧化鈉。

6.如權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于：濃縮洗滌液為含有pH 值為7.5-8.2、0.8-1.2％吐溫-20、0.01-0.02‰硫柳汞防腐劑、0.1-0.2mol/L的磷酸 鹽緩沖液；濃縮復溶液為含有8-12％酪蛋白、pH值為7.3-7.8、0.1-0.3mol/L的 磷酸鹽緩沖液，頭孢噻呋標準品溶液的濃度分別為0μg/L，0.5μg/L，1.5μg/L， 4.5μg/L，13.5μg/L，40.5μg/L，所述百分比為重量百分比。

7.權利要求1～6任一項所述的試劑盒在檢測頭孢類藥物殘留中的應用。

8.一種檢測樣品頭孢類藥物殘留的方法，包括步驟：

(1)樣品前處理；

(2)用權利要求1～6任一項所述的試劑盒進行檢測；

(3)分析檢測結果。