[發明專利]硝基呋喃類物質的一種半抗原、抗原及其制備方法與應用

無效

• 申請號: 200910085648.2
• 申請日: 2009-05-27
• 公開（公告）號: CN101643462A
• 公開（公告）日: 2010-02-10
• 發明（設計）人: 吳小平;江海洋;王戰輝;阮永磊;王進;王亞輝;徐飛
• 申請（專利權）人: 北京維德維康生物技術有限公司
• 主分類號: C07D307/71
• 分類號: C07D307/71;C07K16/44;C07K14/765;C07K14/77;C07K1/113;G01N33/566;G01N33/531
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司
• 代理人: 關 暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及硝基呋喃類物質的一種半抗原、抗原及其制備方法與應用。

背景技術

硝基呋喃類物質(Nitrofurans)是一類人工合成的具有5-硝基呋喃環基本結構的廣譜抗菌藥物，主要包括呋喃西林(Nitrofurazone)、呋喃妥因(Nitrofurantion)、呋喃唑酮(Furazolidone)和呋喃它酮(Furaltadone)。硝基呋喃類物質對大多數革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、真菌和原蟲等病原體均有殺滅作用，在畜禽養殖、水產養殖上應用非常廣泛。但硝基呋喃類物質對畜禽有一定的毒性，動物大劑量或長期連續服用硝基呋喃類物質易引起中毒性反應，表現為厭食、腹瀉、胃腸出血、周圍神經炎、興奮、驚厥或癱瘓等，中毒嚴重時甚至可以引起動物死亡。同時硝基呋喃類物質也是一類具有潛在致癌性和誘導有機體產生突變的物質。1990年7月歐盟頒布2377/90/EEC條例，將硝基呋喃類物質及其代謝產物列為A類禁用藥物，規定其在動物源性食品中的殘留檢測限為1.0μg/kg。由于對呋喃唑酮蛋白結合態殘留物的安全性產生懷疑，自1995年起，歐盟全面規定禁止使用呋喃類抗菌物質，在動物源性食品中呋喃類殘留物的檢出限為不得檢出。歐盟從1997年開始將所有的硝基呋喃類抗生素全部列為違禁藥物。2004年美國FDA公布了禁止在進口動物源性食品中使用的11種藥物名單，其中包括呋喃西林和呋喃唑酮。我國農業部文件農牧發[2002]1號也規定動物源性食品中呋喃唑酮的檢出限為不得檢出。目前，國內外都對呋喃類物質的控制相當嚴格，各國對于呋喃類物質測定的標準都有明確的規定。

國內外已發表的有關硝基呋喃類抗生素殘留檢測方法的文獻中，早期的文獻報道多數是檢測原藥化合物。但研究表明，硝基呋喃類物質原藥的半衰期通常只有幾小時，而其代謝產物則可以長達數周仍能在動物組織中殘留。目前，國內外報道多見于檢測硝基呋喃類物質的代謝物，儀器檢測方法主要有高效液相色譜法(HPLC)、液相色譜-質譜法(LC-MS)、液相色譜-串聯質譜法(LC-MS/MS)。其中，LC-UV、LC-MS及LC-MS/MS是目前用來檢測硝基呋喃類物質代謝物最常用的方法，但在實際操作中需要有LC-UV、LC-MS及LC-MS/MS等高檔儀器，且前處理復雜、繁瑣、操作時間長、操作技術要求高。而免疫分析方法采用針對硝基呋喃類物質代謝物的特異性抗體，可以有很高的精確度、靈敏性和特異性，且對技術要求不高，具有檢測時間短，適用于大批量測定等優點。免疫分析檢測技術是近年來在環境、食品安全監測領域逐漸廣泛應用的一種快速、高通量、低成本的檢測技術，已逐漸成為世界各國對有毒有害殘留物快速篩選監測的主要方法之一，這為硝基呋喃類物質代謝物的檢測提供了一種新的途徑。

發明內容

本發明的目的是提供一種化合物及其制備方法與應用。

本發明所提供的化合物，其化學名稱為4-(4-(5-硝基呋喃-2-甲酰胺基)苯基)丁酸，其結構式如式I所示：

式I。

上述式I結構的化合物的制備方法包括以下步驟：

將5-硝基呋喃-2-甲醛的乙醇溶液和對氨基苯丁酸的乙醇溶液混合，離心，取沉淀得到式I結構的化合物。

上述方法中，所述5-硝基呋喃-2-甲醛和所述對氨基苯丁酸的摩爾比為1∶(1-2)，具體可為1∶1；

所述5-硝基呋喃-2-甲醛的乙醇溶液是將所述5-硝基呋喃-2-甲醛溶于乙醇的水溶液中得到的，所述乙醇的水溶液中，所述乙醇和水的體積比為1∶(1-2)，具體可為1∶1；

所述對氨基苯丁酸的乙醇溶液是將所述對氨基苯丁酸溶于無水乙醇中得到的。

上述方法還包括將所述式I結構的化合物進行干燥的步驟，所述干燥的溫度為50-60℃，具體可為60℃。

上述式I結構的化合物可用于制備硝基呋喃類物質的抗體。

上述式I結構的化合物還可用于檢測硝基呋喃類物質。

本發明的另一個目的是提供一種硝基呋喃化合物及其制備方法與應用。

本發明所提供的硝基呋喃化合物，是將上述式I結構的化合物與載體蛋白偶聯得到的偶聯物。

上述硝基呋喃化合物中，所述載體蛋白為卵清蛋白(OVA)或牛血清白蛋白(BSA)。

上述硝基呋喃化合物的制備方法包括以下步驟：

1)將N，N’-二環己基碳化二亞胺(DCC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)和式I結構的化合物混合，將混合物溶于N，N-二甲基甲酰胺中，得到溶液A；