[發明專利]一種硝基呋喃化合物及其制備方法與應用有效
| 申請號: | 200910085647.8 | 申請日: | 2009-05-27 |
| 公開(公告)號: | CN101643505A | 公開(公告)日: | 2010-02-10 |
| 發明(設計)人: | 吳小平;王戰輝;江海洋;張靜;阮永磊;王進;王亞輝 | 申請(專利權)人: | 北京維德維康生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C07K14/765 | 分類號: | C07K14/765;C07K1/113;C07K16/44;G01N33/543 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 | 代理人: | 關 暢;任鳳華 |
| 地址: | 100085北京*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 硝基 呋喃 化合物 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種硝基呋喃化合物,是將5-硝基呋喃-2-丙烯酸與載體蛋白偶聯得到的偶 聯物;
所述硝基呋喃化合物的制備方法,包括以下步驟:
1)將5-硝基呋喃-2-丙烯酸、N,N’-二環己基碳化二亞胺(DCC)和N-羥基琥 珀酰亞胺(NHS)混合,將混合物溶解于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中,得到溶 液A;
將載體蛋白溶解于磷酸鹽緩沖液中,得到溶液B;
2)將溶液B滴加到溶液A中,得到硝基呋喃化合物;
所述步驟1)中,所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸、所述N,N’-二環己基碳化二亞胺 和所述N-羥基琥珀酰亞胺的摩爾比為1∶(3-5)∶(2-3);
所述載體蛋白為牛血清白蛋白;
所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸與載體蛋白的摩爾比為(8-10)∶1。
2.權利要求1所述化合物的制備方法,包括以下步驟:
1)將5-硝基呋喃-2-丙烯酸、N,N’-二環己基碳化二亞胺(DCC)和N-羥基琥 珀酰亞胺(NHS)混合,將混合物溶解于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中,得到溶 液A;
將載體蛋白溶解于磷酸鹽緩沖液中,得到溶液B;
2)將溶液B滴加到溶液A中,得到硝基呋喃化合物;
所述步驟1)中,所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸、所述N,N’-二環己基碳化二亞胺 和所述N-羥基琥珀酰亞胺的摩爾比為1∶(3-5)∶(2-3);
所述載體蛋白為牛血清白蛋白;
所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸與載體蛋白的摩爾比為(8-10)∶1。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:所述步驟1)中,所述5-硝基呋 喃-2-丙烯酸、所述N,N’-二環己基碳化二亞胺和所述N-羥基琥珀酰亞胺的摩爾比為 1∶4∶3。
4.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:所述5-硝基呋喃-2-丙烯酸與載 體蛋白的摩爾比為8∶1。
5.根據權利要求2-4中任一所述的方法,其特征在于:所述方法還包括將所 述權利要求1所述化合物進行透析的步驟,所述透析的條件為:4-20℃用PBS透 析72-96小時;
所述方法還包括將透析后的權利要求1所述化合物進行離心取上清的步驟,所 述離心的條件為4℃條件下5000-8000rmp離心20-30分鐘。
6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于:所述方法還包括將所述權利要 求1所述化合物進行透析的步驟,所述透析的條件為:4℃用PBS溶液透析72小 時;
所述方法還包括將透析后的權利要求1所述化合物進行離心取上清的步驟,所 述離心的條件為4℃條件下5000rpm離心30分鐘。
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