[發明專利]肽鏈、Lys與脂肪醇鏈的偶聯物及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 200910085164.8
• 申請日: 2009-06-03
• 公開（公告）號: CN101906139A
• 公開（公告）日: 2010-12-08
• 發明（設計）人: 彭師奇;趙明;張慧敏
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學
• 主分類號: C07K7/02
• 分類號: C07K7/02;C07K1/06;C07K1/02;A61K38/08;A61K47/48;A61P7/02;A61K47/42;A61K9/107;A61K9/127
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

技術領域

本發明涉及肽鏈、Lys與脂肪醇鏈的偶聯物，尤其涉及兩根Arg-Gly-Asp-Phe肽鏈通過Lys與一條脂肪醇鏈偶聯的偶聯物，及其制備方法及其用途，屬于生物醫藥領域。

背景技術

GP?II?b/IIIa為血小板膜上纖維蛋白原的受體，它在血小板被激活時暴露并呈現活性，與纖維蛋白特異性結合，導致血小板的聚集和血栓的形成。含Arg-Gly-Asp序列的多肽，可以占領血小板表面的GP?II?b/III?a受體，因此可以抑制纖維蛋白參與的血小板聚集和血栓形成。文獻報道Arg-Gly-Asp-Phe多肽具有很好的抗血栓作用。

細胞黏附在細胞黏附性疾病(癌轉移、血栓形成、化學致炎和骨質疏松)的發展過程中起關鍵作用。調節性糖蛋白例如Arg-Gly-Asp肽與整合素受體有很強的結合能力，可參與細胞黏附過程。例如Arg-Gly-Asp肽與血小板、腫瘤細胞及骨基表面的GP?IIb/IIIa受體特異性結合可干預血栓、癌轉移和骨質疏松的發展過程。Arg-Gly-Asp肽的這種作用賦予了含Arg-Gly-Asp序列的化合物一種重要性質，即含Arg-Gly-Asp序列的化合物可以向血栓、癌轉移和骨質疏松的患病部位富集。在這樣一個前提下，把兩根Arg-Gly-Asp-Phe肽鏈通過Lys與一條脂肪醇鏈偶聯，便可以獲得期待的偶聯物。

發明內容

本發明的目的之一是提供一類具有抗血栓作用的肽鏈、Lys與脂肪醇鏈的偶聯物。

本發明的目的之一是通過以下技術方案實現的：

一類肽鏈、Lys與脂肪醇鏈的偶聯物，是將兩根Arg-Gly-Asp-Phe肽鏈通過Lys與一條脂肪醇鏈偶聯的偶聯物，所述偶聯物的通式為

Arg-Gly-Asp-Phe-Lys(Arg-Gly-Asp-Phe)-OCH₂(CH₂)_nCH₃，其中n＝6，8，10或12。

本發明的目的之二是提供一種制備上述具有抗血栓活性的肽鏈、Lys與脂肪醇鏈偶聯物的方法。

本發明的目的之二是通過以下技術方案來實現的：

一種制備上述肽鏈、Lys與脂肪醇鏈的偶聯物的方法，包括如下步驟：

(1)將保護基保護的賴氨酸與脂肪醇縮合，所述脂肪醇為CH₃(CH₂)_nCH₂OH，n＝6、8、10、12；

(2)脫去N端保護基得到脂肪醇賴氨酸酯；

(3)按照現有液相合成技術，將脂肪醇賴氨酸酯依次與苯丙氨酸的保護中間體、天冬氨酸的保護中間體、甘氨酸的保護中間體和精氨酸的保護中間體逐步接肽合成保護基保護的肽鏈、Lys、脂肪鏈醇偶聯物；

(4)依次脫去保護基保護的肽鏈、Lys、脂肪鏈醇偶聯物的C端保護基和N端保護基得到目標化合物。

其中所述N端保護基是對多肽的N端進行保護時常用的保護基團，例如可以是叔丁氧羰基(Boc)；所述C端保護基是對多肽的C端進行保護時常用的保護基團，例如可以是甲氧基(OMe)；所述側鏈保護基是對多肽側鏈進行保護時常用的保護基團，例如可以是芐氧基(OBzl)、硝基(NO₂)；所述液相合成技術及所述保護、縮合、脫保護的過程是本領域的常規并公知的技術。

該制備方法可以用圖1的路線概括，具體的，所述方法包括：

(1)在DCC、HOBt、NMM和THF存在下將雙叔丁氧羰基保護的賴氨酸分別與CH₃(CH₂)₇OH、CH₃(CH₂)₉OH、CH₃(CH₂)₁₁OH以及CH₃(CH₂)₁₃OH偶聯；

(2)在氯化氫/乙酸乙酯溶液中加入步驟(1)所得的偶聯物，脫去叔丁氧羰基；

(3)在DCC、HOBt、NMM和THF存在下將叔丁氧羰基保護的苯丙氨酸與步驟(2)所得產物偶聯；

(4)在氯化氫/乙酸乙酯溶液中加入步驟(3)所得的偶聯物，脫去叔丁氧羰基；

(5)在DCC、HOBt、NMM和THF存在下將N端叔丁氧羰基保護、側鏈芐氧基保護的天冬氨酸與步驟(4)所得產物偶聯；