[發(fā)明專利]一類肽鏈與雙脂肪醇鏈的偶聯(lián)物及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910085154.4
• 申請(qǐng)日: 2009-06-02
• 公開（公告）號(hào): CN101906141A
• 公開（公告）日: 2010-12-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭師奇;趙明;張慧敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 首都醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K7/06
• 分類號(hào): C07K7/06;C07K1/06;C07K1/02;A61K38/08;A61K47/48;A61P7/02;A61K47/42;A61K9/107;A61K9/127
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;費(fèi)碧華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一類肽鏈與雙脂肪醇鏈的偶聯(lián)物，尤其涉及Arg-Gly-Asp-Phe-Asp肽鏈與兩條脂肪醇鏈的偶聯(lián)物，及其制備方法和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。

背景技術(shù)

GP?II?b/IIIa為血小板膜上纖維蛋白原的受體，它在血小板被激活時(shí)暴露并呈現(xiàn)活性，與纖維蛋白特異性結(jié)合，導(dǎo)致血小板的聚集和血栓的形成。含Arg-Gly-Asp序列的多肽，可以占領(lǐng)血小板表面的GP?II?b/IIIa受體，因此可以抑制纖維蛋白參與的血小板聚集和血栓形成。文獻(xiàn)報(bào)道Arg-Gly-Asp-Phe多肽具有很好的抗血栓作用。

細(xì)胞黏附在細(xì)胞黏附性疾病(癌轉(zhuǎn)移、血栓形成、化學(xué)致炎和骨質(zhì)疏松)的發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用。調(diào)節(jié)性糖蛋白例如Arg-Gly-Asp肽與整合素受體有很強(qiáng)的結(jié)合能力，可參與細(xì)胞黏附過程。例如Arg-Gly-Asp肽與血小板、腫瘤細(xì)胞及骨基表面的GP?IIb/IIIa受體特異性結(jié)合可干預(yù)血栓、癌轉(zhuǎn)移和骨質(zhì)疏松的發(fā)展過程。Arg-Gly-Asp肽的這種作用賦予了含Arg-Gly-Asp序列的化合物一種重要性質(zhì)，即含Arg-Gly-Asp序列的化合物可以向血栓、癌轉(zhuǎn)移和骨質(zhì)疏松的患病部位富集。在這樣一個(gè)前提下，把Arg-Gly-Asp-Phe肽通過Asp與高級(jí)脂肪鏈偶聯(lián)，便可以獲得Arg-Gly-Asp-Phe-Asp與兩條脂肪醇鏈的偶聯(lián)物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一是提供一類具有抗血栓作用的肽鏈與雙脂肪醇疏水臂的偶聯(lián)物。

本發(fā)明的目的之一是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一類肽鏈與雙脂肪醇鏈的偶聯(lián)物，是將一個(gè)Arg-Gly-Asp-Phe-Asp肽鏈與兩條脂肪醇疏水臂偶聯(lián)的偶聯(lián)物，所述偶聯(lián)物的通式為

Arg-Gly-Asp-Phe-Asp[-OCH₂(CH₂)_nCH₃]-OCH₂(CH₂)_nCH₃，其中n＝6，8，10或12。

本發(fā)明的目的之二是提供一種制備上述具有抗血栓活性的肽鏈與雙脂肪醇鏈偶聯(lián)物的方法。

本發(fā)明的目的之二是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：

一種制備所述肽鏈與雙脂肪醇鏈的偶聯(lián)物的方法，包括如下步驟：

(1)將N端保護(hù)基保護(hù)的天冬氨酸與兩個(gè)脂肪醇縮合，所述脂肪醇為CH₃(CH₂)_nCH₂OH，n＝6、8、10、12；

(2)脫去N端保護(hù)基得到雙脂肪醇天冬氨酸酯；

(3)按照現(xiàn)有液相合成技術(shù)，將雙脂肪醇天冬氨酸酯依次與苯丙氨酸的保護(hù)中間體、天冬氨酸的保護(hù)中間體、甘氨酸的保護(hù)中間體和精氨酸的保護(hù)中間體逐步接肽合成保護(hù)基保護(hù)的肽鏈和雙脂肪鏈醇偶聯(lián)物；

(4)依次脫去保護(hù)基保護(hù)的肽鏈和雙脂肪鏈醇偶聯(lián)物的C端保護(hù)基和N端保護(hù)基得到目標(biāo)化合物。

其中所述N端保護(hù)基是對(duì)多肽的N端進(jìn)行保護(hù)時(shí)常用的保護(hù)基團(tuán)，例如可以是叔丁氧羰基(Boc)；所述C端保護(hù)基是對(duì)多肽的C端進(jìn)行保護(hù)時(shí)常用的保護(hù)基團(tuán)，例如可以是甲氧基(OMe)；所述側(cè)鏈保護(hù)基是對(duì)多肽側(cè)鏈進(jìn)行保護(hù)時(shí)常用的保護(hù)基團(tuán)，例如可以是芐氧基(OBzl)、硝基(NO₂)；所述液相合成技術(shù)及所述保護(hù)、縮合、脫保護(hù)的過程是本領(lǐng)域的常規(guī)并公知的技術(shù)。

該制備方法可以用圖1的路線概括，具體的，所述方法包括：

(1)在DCC、HOBt、NMM和THF存在下將叔丁氧羰基保護(hù)的天冬氨酸分別與CH₃(CH₂)₇OH、CH₃(CH₂)₉OH、CH₃(CH₂)₁₁OH以及CH₃(CH₂)₁₃OH偶聯(lián)；

(2)在氯化氫/乙酸乙酯溶液中加入步驟(1)所得的偶聯(lián)物，脫去叔丁氧羰基；

(3)在DCC、HOBt、NMM和THF存在下將叔丁氧羰基保護(hù)的苯丙氨酸與步驟(2)所得產(chǎn)物偶聯(lián)；

(4)在氯化氫/乙酸乙酯溶液中加入步驟(3)所得的偶聯(lián)物，脫去叔丁氧羰基；

(5)在DCC、HOBt、NMM和THF存在下將N端叔丁氧羰基、保護(hù)側(cè)鏈芐氧基保護(hù)的天冬氨酸與步驟(4)所得產(chǎn)物偶聯(lián)；