[發明專利]一種具有降血壓作用的鹽酸貝那普利組合物及其制備方法

無效

• 申請號: 200910085111.6
• 申請日: 2009-05-31
• 公開（公告）號: CN101899485A
• 公開（公告）日: 2010-12-01
• 發明（設計）人: 段震文;郭樹仁;鞏金妹;薛嵐;劉春麗
• 申請（專利權）人: 北京北大維信生物科技有限公司
• 主分類號: C12P17/10
• 分類號: C12P17/10;A61K31/55;A61P9/12;C12R1/66
• 代理公司: 北京太兆天元知識產權代理有限責任公司 11108
• 代理人: 張韜

1.一種具有降血壓作用的鹽酸貝那普利組合物，其特征在于由如下固體發酵方法制備：

斜面菌種培養：選曲霉CICC?2436進行菌種培養，將瓊脂加入4度的麥芽汁，制得Ph?6-8的培養基，使得每體積份培養基含瓊脂0.02-0.1重量份；在100-120℃條件下滅菌，滅菌后冷卻，常規方法制得斜面并接種，在20℃--40℃條件下培養3-7天，作為斜面菌種；固體發酵培養：將麩皮與麥芽汁按照重量體積比為1∶0.5-2的比例混和，混勻后在100-120℃條件下，滅菌20-40分鐘，滅菌后冷卻，接入斜面菌種，使得斜面菌種體積占培養基體積的5-10％，在20-40℃，培養1-5天，在培養好的麩皮中加入0.01-0.5M?ph7pbs緩沖液浸泡過夜，得固體發酵培養液；粗酶液的制備：固體發酵培養液中加入硫酸銨至飽和，攪拌均勻至完全溶解，在4℃條件下放置過夜，離心取沉淀，透析，離心取上清液作為粗酶液；底物的制備：用水溶液溶解鹽酸貝那普利，制成的溶液每體積份含鹽酸貝那普利0.03-0.2重量份，經微孔濾膜無菌過濾后作為底物；酶轉化反應：將粗酶液與底物以體積比為1∶1.5-8混合，在轉化溫度為20-40℃，轉化反應時間為12-48小時，即得組合物。

2.如權利要求1所述的鹽酸貝那普利組合物，其特征在于由如下固體發酵方法制備：

斜面菌種培養：選曲霉CICC?2436進行菌種培養，將瓊脂加入4度的麥芽汁，制得Ph是7的培養基，使得每體積份培養基含瓊脂0.05重量份；在110℃條件下滅菌，滅菌后冷卻，制得斜面并接種，在30℃條件下培養5天，作為斜面菌種；固體發酵培養：將麩皮與麥芽汁按照重量體積比為1∶1的比例混和，混勻后在110℃條件下，滅菌30分鐘，滅菌后冷卻，接入斜面菌種，使得斜面菌種體積占培養基的8％，在30℃，培養3天，在培養好的麩皮中加入0.3M?ph7pbs緩沖液浸泡過夜，得固體發酵培養液；粗酶液的制備：固體發酵培養液中加入硫酸銨至飽和，攪拌均勻至完全溶解，在4℃條件下放置過夜，離心取沉淀，透析，離心取上清液作為粗酶液；底物的制備：用水溶液溶解鹽酸貝那普利，制成的溶液每體積份含鹽酸貝那普利0.1重量份，經微孔濾膜無菌過濾后作為底物；酶轉化反應：將粗酶液與底物以體積比為1∶4混合，在轉化溫度為30℃，轉化反應時間為24小時，即得組合物。

3.如權利要求1所述的鹽酸貝那普利組合物，其特征在于由如下固體發酵方法制備：

斜面菌種培養：選曲霉CICC?2436進行菌種培養，將瓊脂加入4度的麥芽汁，制得Ph?6的培養基，使得每體積份培養基含瓊脂0.03重量份；在105℃條件下滅菌，滅菌后冷卻，常規方法制得斜面并接種，在35℃條件下培養4天，作為斜面菌種；固體發酵培養：將麩皮與麥芽汁按照重量體積比為1∶1.5的比例混和，混勻后在105℃條件下，滅菌35分鐘，滅菌后冷卻，接入斜面菌種，使得斜面菌種體積占培養基體積的6％，在35℃，培養2天，在培養好的麩皮中加入0.5M?ph7pbs緩沖液浸泡過夜，得固體發酵培養液；粗酶液的制備：固體發酵培養液中加入硫酸銨至飽和，攪拌均勻至完全溶解，在4℃條件下放置過夜，離心取沉淀，透析，離心取上清液作為粗酶液；底物的制備：用水溶液溶解鹽酸貝那普利，制成的溶液每體積份含鹽酸貝那普利0.04重量份，經微孔濾膜無菌過濾后作為底物；酶轉化反應：將粗酶液與底物以體積比為1∶7混合，在轉化溫度為25℃，轉化反應時間為40小時，即得組合物。