[發明專利]一種新的檢測血清樣本中禽流感抗體的方法和產品無效
| 申請號： | 200910083003.5 | 申請日： | 2009-04-28 |
| 公開（公告）號： | CN101533023A | 公開（公告）日： | 2009-09-16 |
| 發明（設計）人： | 王靜;楊永莉;楊宇;孫肖紅;胡孔新 | 申請（專利權）人： | 中國檢驗檢疫科學研究院 |
| 主分類號： | G01N33/569 | 分類號： | G01N33/569;G01N33/543;G01N33/546;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京中創陽光知識產權代理有限責任公司 | 代理人： | 尹振啟 |
| 地址： | 100025北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 血清 樣本 禽流感 抗體 方法 產品 | ||
1、一種采用蛋白懸浮芯片檢測血清樣品中禽流感抗體的間接免疫學定量檢測方法，其特征在于，檢測過程中全部反應可在96孔濾板或者微量離心管中進行，該方法包括下列步驟：
(1)包被微球的捕獲抗原為禽流感H5蛋白抗原，
(2)向孔入加入含已包被捕獲抗原編碼微球的工作溶液，用清洗液清洗；
(3)加入待測血清樣品，孵育后清洗；
(4)加入用生物素化的檢測抗體，孵育后清洗；
(5)加入鏈親和素-藻紅蛋白，孵育后清洗；
(6)加入檢測緩沖液后混勻；
(7)用懸浮芯片系統讀取平均熒光強度(MFI)數值并分析數據判定檢測結果。
2、如權利要求1所述的方法，其特征在于，采用生物素標記的羊抗人IgG作為檢測抗體，并且其與抗原禽流感H5蛋白組合組成間接法檢測體系。
3、如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的包被微球的捕獲抗原禽流感H5蛋白抗原用量為3-9μg/1.25×106個編碼微球或6～24ng/2500-5000個微球/測試。
4、如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法中的標記檢測抗體羊抗人IgG的生物素為羧基活性的生物素。
5、如權利要求1所述的方法，其特征在于，2mg/mL生物素化的檢測抗體Bio-羊抗人IgG以1:2500稀釋作為檢測抗體進行檢測。
6、一種定量檢測血清樣品中禽流感抗體的蛋白懸浮芯片方法，其特征在于，該方法包括下列步驟：
(1)加入的陽性檢測樣品或標準品經梯度倍比稀釋，所述梯度倍比稀釋為4倍；
(2)將系列稀釋樣品在懸浮芯片系統中檢測讀取對應熒光值(MFI)；
(3)制作樣品濃度對應MFI值的劑量-反應曲線；
(4)用分析軟件擬合劑量-反應曲線和方程；
(5)未知濃度樣品可根據劑量-反應曲線和方程判斷未知樣本中禽流感抗體的濃度其特征在于，加入的陽性檢測樣品為兔抗禽流感H5N1?IgG。
7、一種檢測血清樣品中禽流感抗體的蛋白懸浮芯片，該芯片包括：編碼微球，作為包被微球抗原是禽流感H5蛋白抗原，生物素標記的羊抗人IgG作為檢測抗體，鏈親和素-藻紅蛋白和適宜的緩沖溶液。
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