[發明專利]與衰老相關退行性疾病的線粒體ND3基因SNP G10310A分子標記、檢測方法及試劑盒

無效

• 申請號: 200910082377.5
• 申請日: 2009-04-15
• 公開（公告）號: CN101532058A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發明（設計）人: 楊澤;馮潔;孔放;張建佚;陳靜;萬鋼;齊科研;唐雷
• 申請（專利權）人: 衛生部北京醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/12;C12N15/11
• 代理公司: 北京北新智誠知識產權代理有限公司
• 代理人: 程鳳儒

技術領域

本發明涉及一種檢測線粒體ND3基因單核苷酸多態性(SNP)的方法，具體地說是一種檢測線粒體ND3基因mtDNA?10310位點的SNP的方法以及檢測該位點SNP的試劑盒和該試劑盒的應用。

背景技術

健康長壽一直是各國研究的熱點，這是由于長壽老人在衰老的過程中并不患衰老相關的退行性疾病如中風，心血管疾病，2型糖尿病，帕金森病，老年性癡呆，癌癥等，而健康的生活。這些衰老相關的退行性疾病不僅給患者帶來沉重的經濟負擔、影響生活質量，同時由于我國自1998年進入老齡化社會以來，老齡人口占全人口構成比(10％)在逐年增高，預計到2020年，我國大于60歲的人口將占全人口的27％，所以也會給社會造成巨大的壓力，將會成為影響我國社會福利和衛生經濟的重大醫學問題。長壽的機制研究可以為衰老相關疾病的病理機制提供線索并可以預測衰老相關疾病的發病風險。

與患衰老相關的退行性疾病是受多個遺傳和環境因素影響的一種復雜遺傳性狀，包括基因之間及基因和環境之間的相互作用。基因和(或)環境通過減少衰老相關的退行性疾病或減緩衰老來促進長壽。但是影響長壽的確切因素迄今為止尚未闡明。雙生子研究表明長壽表型25％是由遺傳因素決定的(Christensen?K，Johnson?TE，Vaupel?JW.The?quest?for?genetic?determinants?of?human?longevity：challengesand?insights.Nature，2006；7：436-448)。同時，家系分析中也表明百歲老人的兄弟姐妹的壽命要比一般人群高約4倍(Christensen?K，Johnson?TE，Vaupel?JW.Thequest?for?genetic?determinants?of?human?longevity：challenges?andinsights.Nature，2006；7：436-448)。這些研究證明了遺傳因素在長壽的機制中起到重要作用。并且，在病例對照的關聯研究中發現了與長壽相關的一些遺傳標記，如4號染色體和一些基因如，APOE，HLA，mtDNA等。

由于線粒體在細胞中的重要作用及線粒體的突變可以引起衰老相關的疾病(Audesh?Bhat，Anil?Koul，Swarkar?Sharma，et?al.The?possible?role?of?10398Aand?16189C?mtDNA?variants?in?providing?susceptibility?to?T2DM?in?two?NorthIndian?populations：a?replicative?study.Hum?Genet，2007，120：821-826.)，因此線粒體DNA可能在長壽的機制中起到重要的作用。更重要的是衰老相關的疾病多表現為母系遺傳，這與線粒體DNA的遺傳方式非常相似。這樣，我們推測長壽人群是遺傳了母親的線粒體DNA，而這些線粒體DNA的表達在功能上可以保護長壽人群不得衰老相關疾病，從而延長了其壽命。這樣，線粒體DNA變異與衰老相關的退行性疾病關系正在越來越受到研究者的關注。線粒體是細胞漿中的小細胞器，含有自己的雙鏈環狀DNA編碼氧化磷酸化過程所需的蛋白及合成這些蛋白所需的tRNA和rRNA。每一細胞含有數千個線粒體，每個線粒體中含有2-10個DNA，因此，每個細胞中含有數萬個DNA拷貝。目前進行的與衰老相關的退行性疾病因研究多采用關聯分析方法，已證明，以SNPs作為基因組標志是有效的。如在日本長壽群體中發現線粒體DNA編碼區的SNP5178A與長壽相關(Tanaka，M.，Gong，J.S.，Zhang，J.，Yoneda，M.，andYagi，K.Mitochondrial?genotype?associated?with?longevity.Lancet，1998；351，185-186)。此后國內外的許多研究進一步證實了5178A這一突變位點與長壽相關。隨后也發現了另一些與長壽相關的SNPs如9055A(Ross?OA，McCormack?R，Curran?MDet?al：Mitochondrial?DNA?polymorphism：its?role?in?longevity?of?the?Irishpopulation.Exp?Gerontol2001；36：1161-1178.)。