[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)α干擾素的方法及其專用菌

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910081495.4
• 申請日: 2009-04-09
• 公開（公告）號(hào): CN101531967A
• 公開（公告）日: 2009-09-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 畢清貴;畢清華
• 申請（專利權(quán)）人: 北京中科拜克生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/00
• 分類號(hào): C12N1/00;C12N1/21;C12P21/02;C12R1/19
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 關(guān) 暢

1.一種重組菌，是大腸埃希氏菌(Escherichia?coli)DH5α/pBV220/Sw?IFN-αCGMCC?NO.2845。

2.一種制備α干擾素的方法，包括如下步驟：發(fā)酵權(quán)利要求1所述重組菌，得到α干擾素。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵的條件包括：溫度為25-35℃，溶氧為20-40％(體積百分含量)，以100-300r/min的速度振蕩，pH值為6.5-7.5。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述溫度為30℃，所述溶氧為30％，所述pH值為7.0，所述振蕩的速度為200r/min。

5.根據(jù)權(quán)利要求2-4中任一所述的方法，其特征在于：所述方法包括在所述發(fā)酵后進(jìn)行純化的步驟；所述純化的方法為依次進(jìn)行強(qiáng)陰離子交換層析和陽離子交換層析。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法中，在所述發(fā)酵后和所述純化前，包括如下分離的步驟：

1)在所述發(fā)酵后，將所述菌破碎，用變性液溶解，得到溶解液；

2)將所述溶解液與0-4℃復(fù)性緩沖液混勻，過夜；

所述變性液為含有5-7mol/L鹽酸胍、1.5-2.5mmol/L?EDTA、40-60mmol/LTris·Cl、9-11mmol/L?DTT、pH值為8-9的溶液；

所述復(fù)性緩沖液為含有0.4-0.6mol/L?L-Arg、1-3mmol/L?EDTA、10-30％(體積百分含量)甘油、0.8-1.0mmol/L?GSSG，0.05-1.15mol/L?Tris·Cl、pH值為7-9的溶液。