[發明專利]人禽流感特異性免疫球蛋白及其制備方法有效
| 申請號： | 200910080588.5 | 申請日： | 2009-03-23 |
| 公開（公告）號： | CN101508733A | 公開（公告）日： | 2009-08-19 |
| 發明（設計）人： | 張小梅;高正倫;蔡芳;陳江婷;丘遠征;尹衛東 | 申請（專利權）人： | 北京科興生物制品有限公司 |
| 主分類號： | C07K16/10 | 分類號： | C07K16/10;A61K35/16;A61K39/42;A61P31/16 |
| 代理公司： | 北京三高永信知識產權代理有限責任公司 | 代理人： | 何文彬 |
| 地址： | 100085*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 禽流感 特異性 免疫球蛋白 及其 制備 方法 | ||
1.一種制備人禽流感特異性免疫球蛋白的方法，包括以下步驟：
(1)用NIBRG-14病毒株接種雞胚，經培養、收獲病毒液、滅活病毒和 純化后制成禽流感疫苗；
(2)將制備的禽流感疫苗免疫接種供血漿者，在最后一次免疫后第0～6 個月采血；
(3)將抗禽流感病毒血漿于0～4℃，1×104轉/分鐘離心20～40分鐘；
(4)在0～4℃溫度條件下，取上清加入飽和硫酸銨溶液，使硫酸銨的質 量百分比濃度為40～50％；攪拌12～20小時后5000～8000轉/分鐘離 心20～50分鐘，收集沉淀；
(5)在0～4℃溫度條件下，將步驟(4)得到的沉淀加入0.01mol/L?PBS 溶液，完全吹溶后5000～8000轉/分鐘離心20～40分鐘，得到上清； 在上清中添加固體溴化鉀使濃度為1.2～1.8mol/L，攪拌1～4小時后 5000～8000轉/分鐘離心1～3小時；
(6)重復步驟(5)的操作1～3次；
(7)將步驟(6)的產物加入0.01mol/L?PBS溶液吹溶后進行蔗糖密度梯 度離心，轉速為2×104轉/分鐘，蔗糖梯度質量百分比濃度為8～10％、 12～15％、18～20％、35～40％，收集梯度離心產物；
(8)將梯度離心產物用0.01mol/L?pH7.2的PBS溶液超濾，0.20～0.25μm 的濾膜過濾；
(9)在pH5.0條件下，60℃滅活10小時；
(10)將滅活后的產物用0.01mol/L?pH7.2的PBS溶液進行超濾，得到禽 流感免疫球蛋白原液；
所述供血漿者是哺乳動物。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的哺乳動物選自 牛、豬或羊。
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