[發明專利]锝-99m標記的二巰基丙酰胺基新乳糖白蛋白配合物及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 200910079369.5
• 申請日: 2009-03-09
• 公開（公告）號: CN101486763A
• 公開（公告）日: 2009-07-22
• 發明（設計）人: 張現忠;楊文江;牟甜甜;王學斌;唐志剛;張俊波;陸潔
• 申請（專利權）人: 北京師范大學;北京師宏藥物研制中心
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K1/13;A61K51/08;A61K103/10
• 代理公司: 北京華夏博通專利事務所
• 代理人: 劉 俊

所屬技術領域

本發明涉及到^99mTc標記的放射性藥物化學和臨床核醫學技術領域，特別是涉及到一種锝-99m標記的二巰基丙酰胺基新乳糖白蛋白配合物及其制備方法和應用。

背景技術

ASGP受體(Asialoglycoprotein?receptor，ASGP-R)是去唾液酸糖白蛋白受體的簡寫，存在于哺乳動物肝細胞膜上，是介導肝臟清除血液中去唾液酸糖蛋白(Asialoglycoprotein，ASGP)的專一位點。除了白蛋白之外幾乎所有血漿蛋白都為糖蛋白，在被肝臟合成并釋放到血液時，其糖鏈末端為唾液酸。唾液酸與其它糖基形成較弱的連接，在血液中并不穩定，很易被清除。唾液酸部分被清除，標志著這個糖蛋白壽命的結束。大部分血漿蛋白中半乳糖結構都位于末端的第二位上，因此當末端的糖被酶解后，以半乳糖結尾的糖蛋白就可以作為ASGP受體的作用底物。去唾液酸糖蛋白一旦在細胞表面與ASGP受體結合，所形成的配體-受體復合物迅速內化，5分鐘左右進入前溶酶體囊泡后由于pH的作用而解離，受體再循環到質膜，大部分配體經溶酶體酶的作用而被分解代謝，小部分配體則繞過溶酶體的降解而排入膽汁，或穿過細胞膜返回細胞表面仍與受體相結合。這個過程可以維持血漿糖蛋白的動態平衡。ASGP受體可以在一定程度上反映出有效肝細胞功能，在肝炎、肝硬化或肝癌等肝損傷性疾病發生時，其數量和活性均受到損害。肝炎疾病在世界范圍內都是一種高發疾病，特別是肝硬化繼發肝癌患者眾多，嚴重影響人類健康與生活質量，其重要性現在已經引起廣泛關注突現。日本已經利用ASGPR顯像劑為核醫學肝臟SPECT顯像建立了三維肝臟模型，該顯像技術可以真實、數字化地反映肝臟功能，這樣既可以對肝硬化患者術前肝功能進行正確的評估，幫助預測手術風險、制定治療方案，降低肝臟手術的圍手術期死亡率。1984年Vera等通過化學合成方法將半乳糖結構與人血清白蛋白偶聯得到新乳糖白蛋白(galactosyl-neoglycoalbumin，NGA)，并經^99mTc標記后進行肝顯像研究。1986年Kubota等研制了一種^99mTc標記GSA(^99mTc-diethylenetriamine?pentaacetic?acid-galactosyl-human?serum?albumin)，通過增加雙功能連接劑DTPA(二乙烯三胺五乙酸)結構，簡化了標記條件，減少了非特異性結合。但^99mTc-GSA仍存在^99mTc結合能力較低、在腎攝取略高等缺點。2004年，Jeong等用β巰基乙醇還原LSA(neolactosyl?human?serum?albumin)得到含有巰基的配體，用^99mTc標記后，顯示出較好的穩定性和優異的生物性能，但是通過還原二硫鍵會破壞蛋白質的結構，進而影響其體內的生物性能。

如何通過NGA分子上引入含巰基的二巰基丙酸，不影響蛋白分子結構的同時，增強其與锝-99m的配位能力，得到锝-99m標記的二巰基丙酰胺基新乳糖白蛋白配合物而制備一種新型锝-99m標記配合物的的肝臟受體顯像劑，是當前本技術領域需要解決的課題。

發明內容

本發明的目的是提供一種具化學穩定性及生物性能好、初始攝取值及化學純度高、制備簡單及使用成本低，應用在肝臟受體顯像領域的锝-99m標記的二巰基丙酰胺基新乳糖白蛋白(^99mTc-DMP-NGA)配合物。

本發明的另一目的是提供一種所述配合物作為肝臟受體顯像劑的制備方法和應用。

為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案：一種锝-99m標記的二巰基丙酰胺基新乳糖白蛋白配合物，其配體分子二巰基丙酰胺基新乳糖白蛋白(DMP-NGA)的結構通式為：

式中：DMP-NGA為配體為在人血白蛋白分子鏈上通過賴氨酸殘基同時連接上n個半乳糖基和m個二巰基丙酰胺基，其中n為20—45，m與n之和小于等于56。

锝-99m標記的二巰基丙酰胺基新乳糖白蛋白配合物的制備方法如下：

以放射性高锝酸鹽(^99mTcO₄^-)與二巰基丙酰胺基新乳糖白蛋白合成配體(DMP-NGA)，在還原劑、保護劑的存在下反應制備得到所述的放射性锝-99m標記的二巰基丙酰胺基新乳糖白蛋白配合物，其制備步驟為：