[發明專利]木耳菌種的組織分離方法

無效

• 申請號: 200910077053.2
• 申請日: 2009-01-19
• 公開（公告）號: CN101473758A
• 公開（公告）日: 2009-07-08
• 發明（設計）人: 崔寶凱;杜萍;戴玉成
• 申請（專利權）人: 北京林業大學
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04;C12N1/14
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所
• 代理人: 葉 凡;王志剛

1、一種木耳菌種的組織分離方法，包括：(1)將干木耳消毒并潤濕；(2)剪取耳片組織塊；(3)將耳片組織塊用酒精燈火焰進行滅菌消毒；(4)將耳片組織塊插入到分離培養基中進行恒溫分離培養；(5)挑取新生長出的菌絲作為接種塊接種至純化培養基中進行純化培養，即得；其中，上述各步驟都是在無菌條件下進行的操作。

2、按照權利要求1所述的組織分離方法，其特征在于：所述的木耳選自黑木耳[Auricularia?auricula(L.)Underw.]、毛木耳[Auriculariapolytricha(Mont.)Sacc.]或皺木耳(Auricularia?delicata(Fr.)Henn.)。

3、按照權利要求1所述的組織分離方法，其特征在于：步驟(2)中所述的耳片組織塊按照以下方法得到：將耳片四周邊緣去掉，剪取遠離耳基沒有筋的平坦部位多塊，得到耳片組織塊。

4、按照權利要求1所述的組織分離方法，其特征在于：所述的用酒精燈進行滅菌消毒是用無菌鑷子夾取耳片組織塊在酒精燈火焰的外焰中快速的來回穿梭2～3次，每次1～2秒。

5、按照權利要求1所述的組織分離方法，其特征在于：所述的耳片組織塊的長度為0.4～0.6cm，寬度為0.1～0.3cm；優選的，所述的耳片組織塊的長度為0.5cm，寬度為0.2cm。

6、按照權利要求1所述的組織分離方法，其特征在于：步驟(4)中所述的分離培養基由各以下組分配制而成：麥芽浸粉20g，瓊脂18g，水1000ml；pH自然。

7、按照權利要求1所述的組織分離方法，其特征在于：所述的分離培養基是分裝于5ml的離心管中，其裝液量為1.8ml的斜面培養基。

8、按照權利要求1所述的組織分離方法，其特征在于：步驟(5)中所述的純化培養基由以下各組分配制而成：麥芽浸粉20g，葡萄糖20g，瓊脂18g，磷酸二氫鉀3g，水1000ml；pH自然。

9、按照權利要求1所述的組織分離方法，其特征在于：所述的純化培養基為平板培養基。

10、按照權利要求1所述的組織分離方法，其特征在于：步驟(5)中挑取新生長出的菌絲作為接種塊將其插入到純化培養基的內部，使接種塊的1/4～1/3部位露出培養基表面即可。