[發(fā)明專利]一種復合微生物抗菌素及其制備方法有效

申請?zhí)枺?/td>	200910071854.8	申請日：	2009-04-22
公開（公告）號：	CN101524180A	公開（公告）日：	2009-09-09
發(fā)明（設計）人：	韓建春;王宇;吳海波;牛愛地	申請（專利權）人：	東北農業(yè)大學
主分類號：	A23L3/3571	分類號：	A23L3/3571
代理公司：	暫無信息	代理人：	暫無信息
地址：	150030黑龍江省***	國省代碼：	黑龍江;23
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種復合微生物抗菌素及其制備方法
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【說明書】：

(一)技術領域

本發(fā)明涉及一種廣譜復合微生物抗菌素及其制備方法，屬食品微生物技術領域。

(二)背景技術

所謂微生物抗菌素是微生物代謝過程中合成并分泌到環(huán)境中的一類對同種的或親緣關系較近的種有抑制作用的殺菌蛋白或多肽物質。這些物質可以殺滅或抑制與之相同或相似生境的其他微生物，所有產生抗菌素的微生物都存在著特異性免疫基因，產生的抗菌素不會對產生菌本身造成傷害。隨著研究的進展，已發(fā)現(xiàn)了一些對食品腐敗微生物和病原微生物具有廣譜抑菌活性的抗菌素。

乳酸菌抗菌素在我國的研究始于八十年代末，但是主要是針對于Nisin的研究，新菌株和高產菌株的篩選以及分子生物學的研究，而對其它乳酸菌產生的細菌素無論在理論上還是在應用上的研究都不夠成熟。1988年，中科院微生物所開始對Nisin進行理論和應用的基礎研究，分離和篩選出能夠產生nisin?Z的乳酸鏈球菌菌株；我國在1990年將其列為食品添加劑增補品種。到了20世紀90年代，國內學者才開始研究其他乳酸菌細菌素。除nisin外，我國乳酸菌細菌素的研究主要集中在菌株篩選、分離純化和一般生物學特性研究，通過優(yōu)化發(fā)酵條件和誘變細菌素產生菌提高細菌素的產量。對細菌素的分子生物學研究較少。乳酸菌在自然界中分布廣泛，而且是人類和動物腸道中正常菌群中的優(yōu)勢菌，乳酸菌不僅具有許多對人類和動物健康有益的生理功能，而且能夠產生很多具有抑菌作用的物質，如有機酸(如乳酸)、過氧化氫和細菌素等抑菌物質，這些抑菌物質不僅能有效的保持食品的風味和組織狀態(tài)，還可以抑制食品中存在的腐敗菌和病原菌的生長，從而防止食品的腐敗，延長食品的保藏期。乳酸菌產生的細菌素是一種具有廣闊應用前景的天然食品防腐劑和飼料添加劑，它對動物無毒性，很容易被人體自身消化道中的蛋白酶降解，所以不會在體內蓄積引起不良反應。

乳酸菌細菌素作為食品類抗菌素并非廣譜抗菌，對革蘭氏陽性菌抑菌效果比較明顯，但對革蘭氏陰性菌、霉菌、酵母等真菌抑殺效果不明顯。本發(fā)明專利選用倆株乳酸菌復合發(fā)酵產生細菌素，與真菌細胞多糖等內容物按比例復配，制備一種具有廣譜抗菌作用的微生物復合抗菌素，主要應用于各類食品保鮮，該抗菌素不受溫度、pH值的限制，對霉菌、酵母以及各類食品腐敗菌抑制效果明顯。

(三)發(fā)明內容

本發(fā)明目的在于提供一種復合微生物抗菌素及其制備方法。

本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的：本發(fā)明中所涉及的比例除另有注明之外為質量比，本發(fā)明的產品采用這樣的方法來制備的：

1.制備過程

1.1乳酸菌混合發(fā)酵制備細菌素

1.1.1菌種來源

發(fā)酵菌株購買于中國工業(yè)微生物菌種保藏中心，名稱和編號為：鼠李糖乳桿菌CICC6141(A)，嗜酸乳桿菌CICC?6075(B)。

1.1.2發(fā)酵過程

1.2.2.1MRS培養(yǎng)基的制備

蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母提取物0.5％，K₂HPO₄0.2％，檸檬酸二胺0.2％，乙酸鈉0.5％，葡萄糖2％，吐溫800.1％，MgSO₄·7H₂O0.058％，MnSO₄·4H₂O?0.025％，其余為去離子水，pH6.2-6.4，121℃滅菌20分鐘。

1.2.2.2發(fā)酵菌株的活化

分別量取0.9％的生理鹽水10ml于5只試管內，經121℃滅菌20分鐘冷卻至30℃，分別將鼠李糖乳桿菌CICC?6141和嗜酸乳桿菌CICC?6075倆株乳酸菌安瓶內的凍干菌粉末在無菌狀態(tài)下全部倒入0.9％的生理鹽水中，震蕩使其溶解，在30℃恒溫箱中靜止活化30分鐘，備用。