[發(fā)明專利]大環(huán)內(nèi)酯類化合物及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910071629.4
• 申請(qǐng)日: 2009-03-25
• 公開（公告）號(hào): CN101619067A
• 公開（公告）日: 2010-01-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 向文勝;王明;王相晶;姜玲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D493/20
• 分類號(hào): C07D493/20;C12P17/18;A61P33/00;A61P33/14;C12R1/465
• 代理公司: 哈爾濱市哈科專利事務(wù)所有限責(zé)任公司
• 代理人: 劉 婭

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及的是一種抗生素，具體地說是一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。本發(fā)明還涉及這種抗生素的制備方法。

(二)背景技術(shù)

目前，國(guó)內(nèi)外應(yīng)用廣泛的大環(huán)內(nèi)酯類農(nóng)用抗生素多拉菌素屬雙糖類化合物，是以環(huán)已氨羧酸(cyclohexanecarboxylic)為前體，通過基因重組的阿維鏈霉菌(streptomyces?avermitilis?strainNEAU1069)新菌株發(fā)酵而成的一種阿維菌素類抗生素，最早發(fā)現(xiàn)它驅(qū)殺寄生蟲的能力是在驅(qū)鼠繼代的蛇形毛圓線蟲和殺兔癢螨的動(dòng)物模型中(參見Goudie，AC.等人，VeterinaryParasitology.49(1993)5-15)。多拉菌素為內(nèi)外兼殺劑，對(duì)線蟲、節(jié)肢動(dòng)物均有良好的驅(qū)殺效果，與市售的伊維菌素類產(chǎn)品比較，其抗生寄蟲范圍更廣泛、血藥濃度高峰維持時(shí)間更長(zhǎng)、半衰期也相對(duì)較長(zhǎng)。而且多拉菌素在動(dòng)物體內(nèi)持效時(shí)間更長(zhǎng)，是目前最具有開發(fā)潛力的獸用抗寄生蟲藥物之一。

(三)發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種具有強(qiáng)的抗寄生蟲及其蟲卵的活性，可用以控制動(dòng)物體內(nèi)外寄生蟲及其蟲卵生存的大環(huán)內(nèi)酯類化合物。

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：

它的分子結(jié)構(gòu)如下：

當(dāng)X-Y...R為CH＝C...H時(shí)為新化合物1的結(jié)構(gòu)；新化合物2的結(jié)構(gòu)特征是X-Y...R為CH₂-CH...OH。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供這種大環(huán)內(nèi)酯化合物的制備方法。

本發(fā)明涉及的化合物是采用這樣的方法來制備的：

1、發(fā)酵

(1)發(fā)酵菌種：發(fā)酵菌種是阿維鏈霉菌突變株(Streptomyces?avermitilis?strain?NEAU1069)，由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生物化工實(shí)驗(yàn)室提供，是于2009年03月11日保藏于“中國(guó)生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心”，保藏登記號(hào)為：CGMCC?NO.2943，命名為NEAU1069(Streptomyces?avermitilis)的菌株。

(2)斜面培養(yǎng)：采用YMS培養(yǎng)基(可溶性淀粉10g，酵母抽提物2g，KNO₃?1g，瓊脂20g，蒸餾水1000ml，pH值7.0)于121℃下滅菌20min，接菌后在28℃下培養(yǎng)6-8d；

(3)種子培養(yǎng)：培養(yǎng)基(葡萄糖20g，大豆粉15g，酵母粉5.0g，蒸餾水1000ml，pH值7.0)，用250ml的三角瓶每瓶分裝25ml，然后用10ml無菌水將斜面的冰城鏈霉菌孢子洗下并制成孢子懸浮液，使其濃度為1×10⁷～1×10⁸個(gè)/ml。每瓶加2ml孢子懸浮液，置于搖床上，轉(zhuǎn)速250r/min，28℃培養(yǎng)24h；

(4)發(fā)酵：采用液體搖瓶發(fā)酵，培養(yǎng)基(玉米粉10％，大豆粉1％，棉花籽粉1％，α-淀粉酶0.02％，NaCl?0.1％，K₂HPO₄?0.2％，MgSO₄·7H₂O?0.1％，CaCO₃?0.7％，環(huán)己烷羧酸鹽0.1％，pH7.0，加蒸餾水1000ml。于121℃下滅菌20min，分裝于1000ml三角瓶，每瓶100ml。接種量8％(V/V)，搖床轉(zhuǎn)速250r/min，28℃振蕩培養(yǎng)12-13d。

2、發(fā)酵液處理

(1)發(fā)酵液經(jīng)100～200目篩網(wǎng)過濾后，濾渣用甲醇提取。

(2)將得到的浸提液濃縮至一定體積后進(jìn)行溶劑萃取，硅膠柱層析和RP-18層析后，得到兩種無色的粉末狀化合物。

本發(fā)明還涉及結(jié)構(gòu)表征如下化合物：化合物1

化合物1的物理化學(xué)性質(zhì)如下：

性狀(Appearance)：白色粉末

溶解性(Solubility)：易溶于氯仿、丙酮、甲醇

比旋度(Specific?rotation)：[α]_D²⁵+123.86(c?0.088，EtOH)；

分子式(Molecular?formula)：C₃₅H₄₆O₆

ESIMS?m/z：563[M+H]⁺，High-resolution?ESIMS：585.3102[M+Na]⁺(calcd?for?C₃₅H₄₆O₆Na，585.3187)；