[發明專利]一種用ACCα基因預示和鑒定雞腹脂量的分子標記方法

有效

• 申請號: 200910071572.8
• 申請日: 2009-03-18
• 公開（公告）號: CN101603086A
• 公開（公告）日: 2009-12-16
• 發明（設計）人: 李輝;田建偉
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 哈爾濱市哈科專利事務所有限責任公司
• 代理人: 劉 婭

1.一種用ACCα基因預示和鑒定雞腹脂量的分子標記方法，其特征在于：

(1)、根據雞ACCα基因序列設計一對引物，其中下游引物3’端最后一個堿基G為人 為設計堿基，不與基因組序列配對：

G2292AF：5’-TAG?GTG?GATGGTTGGGCT?TGA-3’

G2292AR：5’-CCCCAT?CCT?CCA?CCA?CAT?G-3’

(2)、利用該引物對雞的基因組DNA進行PCR擴增；

(3)、利用限制性內切酶Mwo?I消化擴增的PCR產物；

(4)、使用聚丙烯酰胺凝膠對PCR產物進行電泳分離，檢測ACCα基因外顯子19中1個 G→A的單堿基突異位點；

(5)、當雞ACCα基因外顯子19中多態性位點為堿基G時，會產生限制性內切酶Mwo?I 的酶切位點GCTTATC/CAGC，Mwo?I消化PCR產物后會產生2個片段165bp、21bp，將其命名 為GG基因型；該位點為堿基A時GCTTATCCAAC，則不存在Mwo?I酶切位點，MwoI消化PCR產 物后產生1個片段186bp，將其命名為AA基因型；該位點為G/A雜合時，MwoI消化PCR產物 后會產生3個片段186bp、165bp、21bp，將其命名為AG基因型；

其中，用于分析多態性的位點選自雞ACC?α基因如下序列中第464位的G→A的堿基突變：

1????GATGACGTGT?GGTCACTTGT?AAGAGCCCCA?GTACTCTGAC?CATGCAGTTA?GCTGAACCAA????

61???TGTGCAGGTT?ATTTAGGTGG?GCTCAGATTC?CCATTTCCTA?AAGCTTCATG?GTTTGTGATT

121??TAAAATATGT?GCCAGAGGAG?ATTTAGATTG?GATACCAGAA?AGAATTTATT?CAAAGGAGAG

181??GTAGTTAGGT?GTTGTAACAG?ACTGCCCAGG?GAAGTGGTAG?TATTCTGCTA?CCTGGGAACA

241??TTTAAGAGAT?GTGGACGTGG?TGCGTAGGGA?TGTGATTTAG?CAGTGGACTT?GTCATGTTAG

301??GTGGATGGTT?GGGCTTGATG?GTCCTGAAAG?TCTTTTGCAA?CCTAATTCCG?TTCTATCTGT

361??TATTTCCTAG?GTATCGCATC?ACTATAGGTA?ACAAGACCTG?TGTGTTTGAA?AAGGAAAATG

421??ATCCTTCTAT?TCTGCGCTCA?CCTTCGGCTG?GGAAGCTTAT?CCAGTATGTG?GTGGAGGATG，

AA基因型個體的腹脂重和腹脂率極顯著高于AG型和GG型個體的腹脂重和腹脂率。

2.根據權利要求1所述的一種用ACCα預示和鑒定雞腹脂量的分子標記方法，其特征是： 雞腹脂量是雞的腹脂重和腹脂率。

3.根據權利要求1所述的一種用ACCα預示和鑒定雞腹脂量的分子標記方法，其特征是： 所述的聚丙烯酰胺凝膠質量比濃度為14％。