[發明專利]一種快速高效構建S酵母優良菌株的方法無效
| 申請號： | 200910068602.X | 申請日： | 2009-04-24 |
| 公開（公告）號： | CN101525612A | 公開（公告）日： | 2009-09-09 |
| 發明（設計）人： | 曹小紅;侯麗華;王春玲;曾斌 | 申請（專利權）人： | 天津科技大學 |
| 主分類號： | C12N15/01 | 分類號： | C12N15/01;C12N15/04;A23L1/238;C12R1/645 |
| 代理公司： | 天津盛理知識產權代理有限公司 | 代理人： | 王來佳 |
| 地址： | 300457天津市*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 高效 構建 酵母 優良 菌株 方法 | ||
1、一種快速高效構建S酵母優良菌株的方法，其特征在于：構建方法包括如下步驟：
(1)將S酵母菌株采用EMS進行誘變，以確定最佳的EMS誘變時間；
(2)配制含有各種鹽濃度的選擇平板；
(3)對培養后的S酵母菌株雙倍體細胞進行EMS誘變，處理時長為在上步驟所確定的最佳作用時間，并將誘變后的細胞均勻涂布到含鹽的選擇平板上，平板上得到的所有S酵母菌株即為原始突變群體；
(4)將原始突變群體進行高效產孢、以及孢子純化；
(5)將純化后的孢子進行充分融合，融合后的孢子在含鹽的選擇平板上進行篩選，將篩選出的所有單菌落作為下一輪基因組重排的母本；
(6)重復步驟(4)、(5)，最后一輪篩選出的單菌落即為S酵母優良菌株。
2、根據權利要求1所述的一種快速高效構建S酵母優良菌株的方法，其特征在于：所述EMS為甲基磺酸乙酯，其體積百分濃度為2％。
3、根據權利要求1所述的一種構建S酵母優良菌株的方法，其特征在于：所述最佳的EMS誘變時間的確定是采用EMS對5×107個細胞/ml雙倍體S酵母菌株進行隨機誘變，其最佳的誘變時間為60min。
4、根據權利要求1所述的一種構建S酵母優良菌株的方法，其特征在于：基因組重排的輪數為三輪。
5、根據權利要求1所述的一種構建S酵母優良菌株的方法，其特征在于：在含鹽的選擇平板上進行篩選，而且隨著基因組重排次數的增加所采用的選擇平板的含鹽濃度逐步提高。
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