[發明專利]一種祖師麻總香豆素提取物的制備方法和含量測定方法

有效

• 申請號: 200910068386.9
• 申請日: 2009-04-07
• 公開（公告）號: CN101856435A
• 公開（公告）日: 2010-10-13
• 發明（設計）人: 馬莉;韓峰;侯文彬;高靜;張新鑫;申秀萍;王圣明;胡金芳;劉靜
• 申請（專利權）人: 天津藥物研究院
• 主分類號: A61K36/83
• 分類號: A61K36/83;A61P19/02;A61P19/04;A61P29/00;G01N30/36;G01N21/31;A61K135/00;A61K125/00
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 曹津燕

技術領域

本發明屬于天然藥物化學領域，主要涉及一種祖師麻總香豆素提取物的制備方法和含量測定方法。

背景技術

祖師麻為瑞香科(Thymelaeaceae)瑞香屬植物黃瑞香(Daphne?giraldiiNitsche)的根皮和莖皮，具有祛風通絡、祛瘀止痛之功效，常用于治療關節風濕痛等癥。民間用于治療頭痛、牙痛、風濕性關節炎、跌打損傷、胃痛、肝區痛及支氣管炎等癥，俗稱“打的滿地上爬，離不開祖師麻”?，F代藥學研究表明：祖師麻含有多種化學成分，如香豆素類(瑞香素和瑞香苷等)、二萜類(瑞香毒素，12-羥基瑞香毒素，黃瑞香甲素，黃瑞香乙素、黃瑞香丙素等)、木質素類((±)-丁香樹脂醇，(-)-松脂酚，(-)-二氫芝麻素，(-)-落葉松樹脂醇等)、黃酮類、蒽醌類及甾醇類等化學成分。其中，香豆素類成分具有較好的鎮痛、抗急性炎癥和抗佐劑性關節炎作用，可廣泛用于緩解和治療各類疼痛、風濕類風濕性關節炎、關節扭傷挫傷等疾病。

中國發明專利申請CN1883618A公開了一種祖師麻有效部位及其制備方法與應用，該祖師麻有效部位含有藥物有效成分祖師麻甲素(即瑞香素)、西瑞香素和瑞香辛，總香豆素含量為50％～90％。但該專利申請中制備的提取物中雜質含量高且多為黃酮類化合物，在單用分光光度法測定香豆素類化合物含量時，由于黃酮類化合物在總香豆素測定的波長下是有吸收的，導致香豆素類化合物的含量檢測不準確，有效成分香豆素類化合物實際含量偏低。

發明內容

因此，本發明的目的在于提供一種祖師麻總香豆素提取物的制備方法，該制備方法的提取工藝經過進一步優化，制得的祖師麻總香豆素提取物組成明確，雜質含量低，有效成分含量更高，藥效更強，從而降低了服用劑量，減少了副作用。

用于實現本發明上述目的的技術方案如下：

一種祖師麻總香豆素提取物的制備方法，其中包括以下步驟：

(1)以祖師麻藥材為原料，水或C₁～C₅低級醇水溶液為溶劑進行提取，制得浸膏；

(2)將浸膏與固體稀釋劑混合，加入有機溶劑進行提取，回收溶劑得到固體提取物；或者將浸膏加水懸浮，加入有機溶劑進行萃取，回收溶劑得到固體提取物；

(3)將固體提取物加水懸浮，采用大孔吸附樹脂層析，首先以水或C₁～C₅低級醇水溶液為流動相淋洗除雜質，然后以C₁～C₅低級醇水溶液洗脫，收集洗脫液；

(4)前半部分洗脫液回收溶劑得到固體，即一部分祖師麻總香豆素提取物；后半部分洗脫液回收溶劑得到的固體加水混懸，再用有機溶劑萃取，有機層回收溶劑得到固體，即另一部分祖師麻總香豆素提取物。

在上述制備方法的步驟(1)中，提取的方法優選為回流或滲漉；C₁～C₅低級醇水溶液的低級醇濃度可以為0～95％(體積/體積)，優選為30～70％(體積/體積)。

在上述制備方法的步驟(2)中，有機溶劑優選為醋酸乙酯、正丁醇和/或水飽和正丁醇。優選地，上述制備方法的步驟(2)為將浸膏與固體稀釋劑混合，加入有機溶劑進行提取，回收溶劑得到固體提取物；其中，固體稀釋劑可以選自淀粉、微粉硅膠、硅藻土、高嶺土、活性炭和白陶土中的一種或多種。

在上述制備方法的步驟(3)中，大孔吸附樹脂可以選自苯乙烯、苯乙烯-丙烯酸酯、二苯乙烯、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯型樹脂中的一種或多種，例如D101、D201、DA201、HPD300、HPD400、HPD800、FL-1、FL-2和/或AB-8樹脂，優選為苯乙烯型或苯乙烯-丙烯酸酯型大孔吸附樹脂；淋洗除雜質使用的低級醇水溶液的低級醇濃度可以為0～50％(體積/體積)，優選為0～20％(體積/體積)；洗脫樹脂使用的低級醇水溶液的低級醇濃度可以為20～90％(體積/體積)，優選為20～50％(體積/體積)。

在上述制備方法的步驟(4)中，后半部分洗脫液萃取采用的有機溶劑優選為醋酸乙酯和/或正丁醇。