[發(fā)明專利]百白破、A+C群腦膜炎球菌-b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910067156.0
• 申請日: 2009-06-19
• 公開（公告）號: CN101590225A
• 公開（公告）日: 2009-12-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫惠軍;牟盈盈;梁艷婷;李沖;巨爽;楊宗輝
• 申請（專利權(quán)）人: 長春長生生物科技股份有限公司
• 主分類號: A61K39/116
• 分類號: A61K39/116;A61K39/05;A61K39/10;A61K39/08;A61K39/095;A61K39/102;A61P31/04
• 代理公司: 吉林長春新紀(jì)元專利代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 陳宏偉

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明提供一種百白破、A+C群腦膜炎球菌-b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗，用吸附 無細(xì)胞百白破聯(lián)合疫苗、AC群腦膜炎球菌-b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗，預(yù)防腦脊髓 膜炎、肺炎、百日咳、白喉及破傷風(fēng)等重要疫病，屬于疫苗生產(chǎn)制備技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

流行性腦脊髓膜炎(流腦)主要發(fā)病人群是嬰幼兒，A、C群腦膜炎球菌多糖結(jié)合 疫苗主要用于嬰幼兒預(yù)防使用。二十世紀(jì)八十年代，隨著流腦多糖疫苗開發(fā)成功和納 入計(jì)劃免疫，全球范圍內(nèi)接種人數(shù)逐年上升，發(fā)病率逐年下降。我國的流腦發(fā)病以A 群為主，因此開發(fā)的疫苗均為A群多糖或A+C群雙價多糖疫苗，但是2000年在貴州、 2004年在河北分別爆發(fā)了流腦，造成當(dāng)?shù)氐目只?，?jīng)流行病學(xué)調(diào)查證明，引起流行的 是C群菌株，這就引起了疾病控制部門的重視?，F(xiàn)行A+C群腦膜炎球菌多糖疫苗安全， 有效，保護(hù)率可達(dá)80-90％。但該疫苗對2歲以下嬰幼兒免疫效果差，接種一劑不能達(dá) 到抗體保護(hù)水平，且抗體很快消失。因該疫苗與其它多糖疫苗一樣，屬T細(xì)胞非依賴 性抗原，2歲以下嬰幼兒免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，對大多數(shù)莢膜多糖的抗體應(yīng)答反應(yīng)較 弱，僅產(chǎn)生低水平的特異性抗體，多糖結(jié)合物可刺激嬰幼兒的T細(xì)胞依賴性抗體的合 成，并可加強(qiáng)應(yīng)答，與非結(jié)合物疫苗相比還提高了免疫球蛋白(IgG)的抗體比例。

b型流感嗜血桿菌(Hib)通過飛沫傳播感染，引起五歲以下兒童鼻咽炎、會咽炎 等原發(fā)性疾??；細(xì)菌從局部進(jìn)入血液或通過血腦屏障，引起肺炎、化膿性腦膜炎、關(guān) 節(jié)炎、骨髓炎、心包炎和敗血癥等嚴(yán)重的侵襲性疾病。WHO指出全世界每年有300萬例 的Hib感染，其中死亡6萬例(2％)，在發(fā)達(dá)國家以腦膜炎為主，在發(fā)展中國家以肺炎 為主。

鑒于A、C群腦膜炎球菌和b型流感嗜血桿菌引起疾病的嚴(yán)重性和疫苗的有效性， 研發(fā)該疫苗具有極其重要的意義。在目前已使用Hib疫苗的38個國家中，其免疫程序 遵照的原則是：1)在出生后2-6月齡之間完成基礎(chǔ)免疫程序，每劑注射間隔至少1個 月；2)出生后12-24個月之間可以進(jìn)行一次加強(qiáng)免疫。遵照這一原則，用吸附無細(xì)胞 百白破聯(lián)合疫苗、AC群腦膜炎球菌-b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗，于出生后2-6月齡 之間完成基礎(chǔ)免疫，12-24個月之間完成加強(qiáng)免疫。按該免疫程序可同時預(yù)防A、C群 引起的流行性腦脊髓膜炎、Hib導(dǎo)致的疾病、百日咳、白喉和破傷風(fēng)，同時減少兒童免 疫次數(shù)。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明提供一種百白破、A+C群腦膜炎球菌-b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗，采用A、 C群腦膜炎奈瑟氏雙球菌、b型流感嗜血桿菌培養(yǎng)液，分別提取莢膜多糖，經(jīng)過純化、 活化后，與破傷風(fēng)類毒素結(jié)合，然后將A、C群腦膜炎多糖結(jié)合疫苗原液、b型流感嗜 血桿菌結(jié)合疫苗原液與無細(xì)胞百白破原液按一定比例混合，獲得一針多種免疫的效果。

本發(fā)明聯(lián)合疫苗含以下組分及含量：

A群腦膜炎球菌多糖：??????10μg

C群腦膜炎球菌多糖：??????10μg

b型流感嗜血桿菌多糖：????10μg

乳糖：???????????????????2.5～3.0mg

無細(xì)胞百日咳原液：???????18μgPN/ml

白喉類毒素：?????????????25Lf/ml

破傷風(fēng)類毒素：???????????7Lf/ml

氫氧化鋁含量：???????????1.0～1.5mg/ml

本發(fā)明聯(lián)合疫苗的制備工藝，包括以下步驟：

1.菌種的的選用：選用A、C群腦膜炎奈瑟氏球菌，b型流感嗜血桿菌菌種，用于 A、C群腦膜炎球菌-b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗的制備。

2.生產(chǎn)用種子

啟開工作種子批菌種，經(jīng)適當(dāng)傳代，經(jīng)檢定合格后，接種改良半綜合培養(yǎng)基或其 他適宜培養(yǎng)基，制備數(shù)量適宜的生產(chǎn)用種子。

3.生產(chǎn)用培養(yǎng)基

采用改良半綜合培養(yǎng)基或經(jīng)批準(zhǔn)的其他適宜培養(yǎng)基。培養(yǎng)基不應(yīng)含有與十六烷基 三甲基溴化銨形成沉淀的成分。

4.培養(yǎng)

采用培養(yǎng)罐液體培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中取樣進(jìn)行純菌檢查，涂片做革蘭氏染色鏡檢， 如發(fā)現(xiàn)污染雜菌，應(yīng)廢棄。

5.收獲和殺菌