[發明專利]一種具靶向作用的阿霉素-白蛋白微球制備方法

無效

• 申請號: 200910066561.0
• 申請日: 2009-02-24
• 公開（公告）號: CN101569609A
• 公開（公告）日: 2009-11-04
• 發明（設計）人: 高其品;張艷秋;姜瑞芝;潘志;高陽;徐多多
• 申請（專利權）人: 高其品
• 主分類號: A61K9/16
• 分類號: A61K9/16;A61K31/42;A61K31/704;A61P35/00
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技術領域

本發明涉及以超聲霧化法制備阿霉素-白蛋白微球和其作為靶向性抗腫瘤藥方面的應用，屬于醫藥技術領域。

背景技術：

阿霉素(Adriamycin，ADR)是一種抑制癌細胞DNA合成的抗腫瘤藥物，廣泛應用于實體瘤的治療，但因其對消化道、心臟及骨髓抑制等毒性，限制其臨床應用。目前減少阿霉素毒性的主要方法是應用藥物載體改變阿霉素在組織和器官中的分布，減少阿霉素在全身特別是心臟中的分布，提高其在靶組織的含量。

微球作為一種藥物載體具有靶向性，已有多種制備方法。本發明采用“超聲霧化法”新方法制備阿霉素白蛋白微球。通過超聲波產生含藥白蛋白霧滴，通過丙酮等有機溶媒蒸汽對形成的霧滴進行分散、初步固化，通過加熱、加入交聯劑等方法使其徹底變性、固化，形成微球。該方法可大規模連續生產載藥白蛋白微球。制備的微球具有良好的肝、脾靶向性，并可明顯降低所載藥物在心臟、腦、腸等中的分布。

本發明以阿霉素-白蛋白微球為例，闡明應用超聲霧化法制備載藥白蛋白微球的方法；制備的微球生物學性質、在不同組織和器官中的分布特征。

發明內容

本發明首次提供了超聲霧化法制備阿霉素-白蛋白微球的方法。所制備的阿毒素-白蛋白微球可作為新型靶向性抗腫瘤藥物開發和應用。

通過超聲波產生含藥白蛋白霧滴，通過丙酮等有機溶媒蒸汽對形成的霧滴進行分散、初步固化，使其不能相互碰撞形成大的液滴，隨即通過加熱、加入交聯劑等方法使其徹底變性、固化，形成微球。該方法可大規模、連續制備微球，適合工業化生產。

本發明制備的阿霉素-白蛋白微球經激光微粒測定儀檢測，其粒徑分布在0.1～5.0μm之間，平均值為2.16μm，其中93％＜5μm；平均載藥量在1-5％之間；靜脈給藥五分鐘后既有三分之二由血液中清除進入組織和器官，由血中清除的速率高；采用動態透析法考察阿霉素-白蛋白微球的體外釋藥規律，阿霉素-白蛋白微球溶液釋藥呈持續緩慢狀態，在168小時釋放度僅達80％，具有緩釋作用；阿霉素-白蛋白微球組給藥后的60min在肝和脾的阿霉素平均濃度分別為游離阿霉素組的四倍以上，對肝和脾表現出明顯的靶向性；而在心臟中，游離阿霉素組的阿霉素含量高于阿霉素-白蛋白微球組5倍以上，心臟中的分布明顯降低；阿霉素-白蛋白微球組各時間點在腦、小腸、胃均未檢測到，表明腦、小腸、胃中幾乎沒有分布。

該方法制備的微球可根據要求，通過改變固化時間、加入固化劑的量制備不同降解時間的微球；通過改變加入白蛋白溶液不同的藥物，制備含不同藥物的白蛋白微球；通過改變加入藥物的量，制備含藥量不同的白蛋白微球。

附圖說明

下面結合附圖和實施方案對本發明進一步說明。

圖1是交聯劑濃度與降解時間關系圖；

圖2是固化時間與降解時間關系圖；

圖3是阿霉素和阿霉素-白蛋白微球的體外釋藥曲線圖；

實施方案

阿霉素-白蛋白微球通常是通過以下兩種方法制得的。

方法1：在超聲霧化器中加入阿霉素與人血白蛋白混合水溶液，其中人血白蛋白水溶液的濃度可在2％-6％之間，阿霉素的濃度可在1％-5％之間。將加熱產生的丙酮蒸汽導入到一密閉管道中，管道的末端連接一冷凝器和接收器，當丙酮蒸汽充滿管道后，開動超聲霧化器并將產生的霧滴導入到丙酮蒸汽的管道中，與丙酮蒸汽充分混合，使其中的白蛋白溶液變性、固化，由霧滴轉變為微球；混合后的氣體通過冷凝器冷卻、收集，得到含初步固化微球的丙酮溶液。收集完畢后，取下接收瓶，在1500r.min^-1磁力攪拌下，根據降解時間的需要，緩慢加入戊二醛交聯劑，攪拌一定時間，離心，收集制備的微球，用蒸餾水反復離心洗滌，即得紅色阿霉素-白蛋白微球。

方法2：按照方法一，制得含初步固化微球的丙酮溶液，收集完畢后，取下接收瓶，放到水浴中，在1500r.min^-1磁力攪拌下加熱回流，使其徹底變性、固化，用蒸餾水反復離心洗滌，制得含阿霉素的白蛋白微球。

交聯劑的濃度、固化時間的選擇：交聯劑的濃度、固化時間對微球的生物降解(胰蛋白酶法)影響顯著(見圖1和圖2)。戊二醛濃度＞0.20％后，每增大0.05％，體外降解時間相應增長約20min。圖2表明固化時間超過90min后降解時間無明顯變化，固化時間90min為宜。