[發(fā)明專利]一種具靶向作用的阿霉素-白蛋白微球制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910066561.0
• 申請日: 2009-02-24
• 公開（公告）號: CN101569609A
• 公開（公告）日: 2009-11-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高其品;張艷秋;姜瑞芝;潘志;高陽;徐多多
• 申請（專利權(quán)）人: 高其品
• 主分類號: A61K9/16
• 分類號: A61K9/16;A61K31/42;A61K31/704;A61P35/00
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及以超聲霧化法制備阿霉素-白蛋白微球和其作為靶向性抗腫瘤藥方面的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

阿霉素(Adriamycin，ADR)是一種抑制癌細胞DNA合成的抗腫瘤藥物，廣泛應(yīng)用于實體瘤的治療，但因其對消化道、心臟及骨髓抑制等毒性，限制其臨床應(yīng)用。目前減少阿霉素毒性的主要方法是應(yīng)用藥物載體改變阿霉素在組織和器官中的分布，減少阿霉素在全身特別是心臟中的分布，提高其在靶組織的含量。

微球作為一種藥物載體具有靶向性，已有多種制備方法。本發(fā)明采用“超聲霧化法”新方法制備阿霉素白蛋白微球。通過超聲波產(chǎn)生含藥白蛋白霧滴，通過丙酮等有機溶媒蒸汽對形成的霧滴進行分散、初步固化，通過加熱、加入交聯(lián)劑等方法使其徹底變性、固化，形成微球。該方法可大規(guī)模連續(xù)生產(chǎn)載藥白蛋白微球。制備的微球具有良好的肝、脾靶向性，并可明顯降低所載藥物在心臟、腦、腸等中的分布。

本發(fā)明以阿霉素-白蛋白微球為例，闡明應(yīng)用超聲霧化法制備載藥白蛋白微球的方法；制備的微球生物學(xué)性質(zhì)、在不同組織和器官中的分布特征。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明首次提供了超聲霧化法制備阿霉素-白蛋白微球的方法。所制備的阿毒素-白蛋白微球可作為新型靶向性抗腫瘤藥物開發(fā)和應(yīng)用。

通過超聲波產(chǎn)生含藥白蛋白霧滴，通過丙酮等有機溶媒蒸汽對形成的霧滴進行分散、初步固化，使其不能相互碰撞形成大的液滴，隨即通過加熱、加入交聯(lián)劑等方法使其徹底變性、固化，形成微球。該方法可大規(guī)模、連續(xù)制備微球，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明制備的阿霉素-白蛋白微球經(jīng)激光微粒測定儀檢測，其粒徑分布在0.1～5.0μm之間，平均值為2.16μm，其中93％＜5μm；平均載藥量在1-5％之間；靜脈給藥五分鐘后既有三分之二由血液中清除進入組織和器官，由血中清除的速率高；采用動態(tài)透析法考察阿霉素-白蛋白微球的體外釋藥規(guī)律，阿霉素-白蛋白微球溶液釋藥呈持續(xù)緩慢狀態(tài)，在168小時釋放度僅達80％，具有緩釋作用；阿霉素-白蛋白微球組給藥后的60min在肝和脾的阿霉素平均濃度分別為游離阿霉素組的四倍以上，對肝和脾表現(xiàn)出明顯的靶向性；而在心臟中，游離阿霉素組的阿霉素含量高于阿霉素-白蛋白微球組5倍以上，心臟中的分布明顯降低；阿霉素-白蛋白微球組各時間點在腦、小腸、胃均未檢測到，表明腦、小腸、胃中幾乎沒有分布。

該方法制備的微球可根據(jù)要求，通過改變固化時間、加入固化劑的量制備不同降解時間的微球；通過改變加入白蛋白溶液不同的藥物，制備含不同藥物的白蛋白微球；通過改變加入藥物的量，制備含藥量不同的白蛋白微球。

附圖說明

下面結(jié)合附圖和實施方案對本發(fā)明進一步說明。

圖1是交聯(lián)劑濃度與降解時間關(guān)系圖；

圖2是固化時間與降解時間關(guān)系圖；

圖3是阿霉素和阿霉素-白蛋白微球的體外釋藥曲線圖；

實施方案

阿霉素-白蛋白微球通常是通過以下兩種方法制得的。

方法1：在超聲霧化器中加入阿霉素與人血白蛋白混合水溶液，其中人血白蛋白水溶液的濃度可在2％-6％之間，阿霉素的濃度可在1％-5％之間。將加熱產(chǎn)生的丙酮蒸汽導(dǎo)入到一密閉管道中，管道的末端連接一冷凝器和接收器，當(dāng)丙酮蒸汽充滿管道后，開動超聲霧化器并將產(chǎn)生的霧滴導(dǎo)入到丙酮蒸汽的管道中，與丙酮蒸汽充分混合，使其中的白蛋白溶液變性、固化，由霧滴轉(zhuǎn)變?yōu)槲⑶颍换旌虾蟮臍怏w通過冷凝器冷卻、收集，得到含初步固化微球的丙酮溶液。收集完畢后，取下接收瓶，在1500r.min^-1磁力攪拌下，根據(jù)降解時間的需要，緩慢加入戊二醛交聯(lián)劑，攪拌一定時間，離心，收集制備的微球，用蒸餾水反復(fù)離心洗滌，即得紅色阿霉素-白蛋白微球。

方法2：按照方法一，制得含初步固化微球的丙酮溶液，收集完畢后，取下接收瓶，放到水浴中，在1500r.min^-1磁力攪拌下加熱回流，使其徹底變性、固化，用蒸餾水反復(fù)離心洗滌，制得含阿霉素的白蛋白微球。

交聯(lián)劑的濃度、固化時間的選擇：交聯(lián)劑的濃度、固化時間對微球的生物降解(胰蛋白酶法)影響顯著(見圖1和圖2)。戊二醛濃度＞0.20％后，每增大0.05％，體外降解時間相應(yīng)增長約20min。圖2表明固化時間超過90min后降解時間無明顯變化，固化時間90min為宜。