[發(fā)明專利]一種小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910066217.1
• 申請(qǐng)日: 2009-10-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101709308A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-05-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹文偉;楊建武;左麗萍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南健古生物工程有限公司
• 主分類號(hào): C12P1/02
• 分類號(hào): C12P1/02;C12P19/04;C12R1/79;C12R1/645
• 代理公司: 洛陽(yáng)市凱旋專利事務(wù)所 41112
• 代理人: 林志堅(jiān)

1.一種小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法，其特征是：所述小麥酒精廢糟液以小麥為原料，經(jīng)過(guò)液體深層發(fā)酵，釀造酒精，獲得酒精廢糟液，包括如下步驟：

a、獲得清液：

將所述小麥酒精廢糟液中的固體由液體分離分離出來(lái)，獲得清液；

b、獲得菌種擴(kuò)培培養(yǎng)基，進(jìn)行菌種擴(kuò)培；

1)、斜面菌種培養(yǎng)基制備和斜面菌種擴(kuò)培；斜面菌種培養(yǎng)基采用PDA綜合培養(yǎng)基接種于24-27℃下培養(yǎng)10-15天；

2)、搖瓶培養(yǎng)基，種子發(fā)酵罐的培養(yǎng)基制備及種子擴(kuò)培：

搖瓶培養(yǎng)基和種子發(fā)酵罐培養(yǎng)基相同，即步驟a所獲得清液加入0-0.5％酵母膏；0-4％蔗糖，用NaOH和HCl調(diào)PH值至5.5-6.5；

搖瓶培養(yǎng)：取前述獲取物250毫升的三角瓶?jī)?nèi)，裝入70-90毫升的培養(yǎng)基，750毫升三角瓶，裝量為100-120毫升/瓶；滅菌后，冷卻至30℃時(shí)接入斜面菌種“PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的，不超過(guò)10天的食用、藥用真菌的菌種”用接種下一小塊，大約1cm²左右純培養(yǎng)物，于24-27℃條件下，靜置24小時(shí)后置于搖床上160-180rpm于24-27℃左右，振蕩培養(yǎng)48-72小時(shí)；

c、種子發(fā)酵罐培養(yǎng)：

在通用式機(jī)械攪拌發(fā)酵罐或者氣升式氣體攪拌式發(fā)酵罐中進(jìn)行；常規(guī)滅菌后按5-10％接種量，接入搖瓶種子，其發(fā)酵條件為：采用機(jī)械攪拌式發(fā)酵罐；0-12小時(shí)：攪拌速度為80-100rpm，通氣量為0.5∶1vvm；或12-72小時(shí)攪拌速度120rpm-140rpm通氣量為0.5∶1vvm，采用氣升式空氣攪拌式發(fā)酵罐；或0-12小時(shí)時(shí)0.25∶1vvm，12-72小時(shí)為0.5∶1vvm；其中種子發(fā)酵罐培養(yǎng)溫度為24-27℃；發(fā)酵周期為48-72小時(shí)；

獲得發(fā)酵培養(yǎng)基后，進(jìn)行食用、藥用真菌液體深層發(fā)酵：發(fā)酵培養(yǎng)基的成份與搖瓶、種子發(fā)酵罐的擴(kuò)培培養(yǎng)基相同；即步驟a所獲得清液加入0-0.15％酵母膏，0-4％蔗糖，用NaOH和HCl調(diào)PH值至5.5-6.5；然后常規(guī)滅菌，滅菌后按5-10％的接種量，接入種子；

其中發(fā)酵控制：前72小時(shí)與種子發(fā)酵罐條件相同，用機(jī)械攪拌發(fā)酵罐；72-144小時(shí)，攪拌速度為160-200rpm，通氣為0.5∶1vvm，氣升式生物反應(yīng)器空氣攪拌的條件；72-144小時(shí)為0.75∶1vvm；發(fā)酵溫度為24-27℃，然后進(jìn)入食用、藥用真菌菌粉的生產(chǎn)，其中按本步驟發(fā)酵至144小時(shí)左右，還原糖下降變緩，即可終止發(fā)酵；

d、將發(fā)酵液“內(nèi)含菌絲體”加入提取多糖時(shí)獲得的瀘餅，以調(diào)解含水量；通過(guò)膠體磨、研磨、均質(zhì)，使其基質(zhì)顆粒小于5微米，通過(guò)離心式噴霧干燥機(jī)，噴霧干燥成食用、藥用真菌菌粉，其中水份為≤10％；

e、食用、藥用真菌多糖的生產(chǎn)：按步驟c，發(fā)酵終止時(shí)將發(fā)酵罐內(nèi)溫度控制到90℃，維持5小時(shí)，待冷卻在35℃左右進(jìn)行板框過(guò)濾；然后收集濾液，真空濃縮至原體積的1/5左右；通過(guò)離心式噴霧干燥機(jī)，噴霧干燥，成為食用、藥用真菌多糖產(chǎn)品；所述濾餅，在生產(chǎn)菌粉時(shí)待用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法，其特征是：所述PDA綜合培養(yǎng)基為馬鈴薯200克，蔗糖20克，磷酸二氫鉀3克，硫酸鎂1.5克，水1000毫升，瓊脂20克。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法，其特征是：所述PDA綜合培養(yǎng)基的加工為：200克馬鈴薯，洗凈去皮切成小塊，加水1000ml煮沸半個(gè)小時(shí)或高壓蒸煮20分鐘，紗布過(guò)濾，再依次添加蔗糖20克，磷酸二氫鉀3克，硫酸鎂1.5克，水1000毫升和瓊脂20克，充分溶解后趁熱紗布過(guò)濾，分裝試管，每試管約5-10ml“視試管大小而定”，15磅蒸氣“121℃”滅菌20分鐘左右后取出試管擺斜面，冷卻后貯存待用。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法，其特征是：所述步驟a的獲得清液過(guò)程為：利用離心機(jī)對(duì)所述小麥酒精廢糟液離心方式獲得所述清液，或利用過(guò)濾方式獲得所述清液，或?qū)⑺鲭x心或過(guò)濾方式獲得的清液濃縮后再次加水稀釋獲得所述清液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法，其特征是：將步驟b或c獲得搖瓶培養(yǎng)基種子發(fā)酵罐的培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基；搖瓶、種子罐、發(fā)酵罐的培養(yǎng)基均用小麥酒精廢糟液由步驟a所獲得的清液為母體加入酵母膏0-0.5％，蔗糖0-4％，調(diào)PH值5.5-6.5而制成。