[發明專利]一種快速篩選高效表達抗菌肽酵母工程菌的新方法無效
| 申請號： | 200910062860.7 | 申請日： | 2009-06-30 |
| 公開（公告）號： | CN101643744A | 公開（公告）日： | 2010-02-10 |
| 發明（設計）人： | 馬向東;胡凡 | 申請（專利權）人： | 湖北大學 |
| 主分類號： | C12N15/81 | 分類號： | C12N15/81;C12N15/64;C12R1/84 |
| 代理公司： | 武漢金堂專利事務所 | 代理人： | 丁齊旭 |
| 地址： | 430062湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 篩選 高效 表達 抗菌 酵母 工程 新方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種快速篩選高效表達抗菌肽酵母工程菌的新方法，其特征步驟為：
1).質粒的構建，將抗菌肽基因和具有可觀察特征伴侶蛋白基因進行融合，中間添加一個酵母自生可識別切割位點，將融合基因克隆至酵母分泌表達載體pHBM905多克隆位點，構建的表達載體為pHBM306，
2).酶切使質粒線性化，
3).電穿孔轉化，利用營養缺陷篩選，28℃培養36-48小時，
4).根據酶水解圈的大小，初步篩選水解圈大的菌落,也就是此次產生抗菌肽產量高的菌落，
5).將每批篩選到的可能高產菌株集中進行復篩，獲得水解圈最大的菌落，最后經過驗證獲得抗菌肽表達高產工程菌。?
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