[發明專利]一種神經生長因子海綿劑及其制備方法

無效

• 申請號: 200910062835.9
• 申請日: 2009-06-23
• 公開（公告）號: CN101612113A
• 公開（公告）日: 2009-12-30
• 發明（設計）人: 湯華東;陳亞;李汝霖
• 申請（專利權）人: 武漢海特生物制藥股份有限公司
• 主分類號: A61K9/00
• 分類號: A61K9/00;A61K38/18;A61K47/48;A61K47/42;A61P25/00;C07K14/78;C07K1/14
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司
• 代理人: 黃行軍

1、一種神經生長因子海綿劑，其特征在于，該海綿劑包括0.01～2％ 重量百分含量的神經生長因子和膠原海綿或明膠海綿基質，所述神經 生長因子經醛類交聯劑交聯固定在膠原海綿或明膠海綿基質上。

2、根據權利要求1所述一種神經生長因子海綿劑，其特征在于， 所述膠原海綿或明膠海綿基質中含有：

85～99％所述海綿劑重量百分含量的膠原蛋白或明膠；

0.3％～9％所述海綿劑重量百分含量的蛋白保護劑；

0.5％～5％所述海綿劑重量百分含量的增塑劑。

3、根據權利要求1所述一種神經生長因子海綿劑，其特征在于， 所述醛類交聯劑為甲醛、多聚甲醛或戊二醛。

4、根據權利要求1或2所述一種神經生長因子海綿劑，其特征 在于，所述神經生長因子為動物源性神經生長因子或采用基因工程重 組技術制備的神經生長因子。

5、根據權利要求4所述一種神經生長因子海綿劑，其特征在于， 所述動物源性神經生長因子為人胎盤神經生長因子、小鼠頜下腺神經 生長因子或蛇毒神經生長因子。

6、根據權利要求4所述一種神經生長因子海綿劑，其特征在于， 所述采用基因工程重組技術制備的神經生長因子為重組人神經生長 因子或重組鼠神經生長因子。

7、根據權利要求2所述一種神經生長因子海綿劑，其特征在于， 所述蛋白保護劑為人血白蛋白或牛血清白蛋白。

8、根據權利要求2所述一種神經生長因子海綿劑，其特征在于， 所述增塑劑為甘油或聚乙二醇。

9、根據權利要求8所述一種神經生長因子海綿劑，其特征在于， 所述聚乙二醇為聚乙二醇1000、聚乙二醇4000、或聚乙二醇6000。

10、根據權利要求2所述一種神經生長因子海綿劑，其特征在于， 所述膠原蛋白為采用以下方法制備的：

(1)取豬腿、牛腿或馬腿的肌腱，去除表皮層、脂肪等雜質， 切片后用冷純化水清洗干凈；

(2)用20％氯化鈉浸泡洗滌2～3次脫脂、去血清等雜質；

(3)溶于30～60倍體積的1％乙酸溶液中，加入終濃度為0.4％ 的胃蛋白酶，37℃攪拌消化1小時后，2～8℃放置繼續消化5～10天；

(4)將消化液離心，收集上清，加入NaCl至終濃度為2mol/L， 2～8℃沉淀過夜，收集沉淀；將沉淀重溶于0.1～1％乙酸溶液中，離心 收集上清，加入NaCl至終濃度為1～2mol/L，2～8℃沉淀過夜，收集 沉淀，即得膠原蛋白。

11、根據權利要求2所述一種神經生長因子海綿劑，其特征在于， 所述明膠為市售醫用明膠。

12、一種制備權利要求2所述神經生長因子海綿劑的制備方法， 其特征在于，該方法包括如下步驟：

(1)將膠原蛋白或明膠溶于0.1％～1％乙酸溶液中，制成0.1～3％ 膠原蛋白或明膠溶液，于0.2～2mmol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4～8.0) 中透析至中性；

(2)在上述膠原蛋白或明膠溶液中，加入神經生長因子、蛋白 保護劑和增塑劑，使最終各組份重量百分含量分別為：神經生長因子 0.01～2％，膠原蛋白或明膠85～99％，蛋白保護劑0.3％～9％，增塑劑 0.5％～5％，于-80～-20℃冷凍2～5天，凍干得到海綿狀材料；

(3)將上述海綿狀材料置于氣體發生器中，30～45℃下用醛類交 聯劑熏蒸交聯固定1～24小時；

(4)切割，真空包裝，滅菌、滅病毒，制得神經生長因子海綿 劑成品。