[發明專利]結合結核桿菌噬菌體尾部蛋白的抗體及其制備方法和應用有效
| 申請號: | 200910057771.3 | 申請日: | 2009-08-20 |
| 公開(公告)號: | CN101993490A | 公開(公告)日: | 2011-03-30 |
| 發明(設計)人: | 胡志能;楊揮 | 申請(專利權)人: | 上海英伯肯醫學生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C07K16/08 | 分類號: | C07K16/08;C12N5/20;C12N15/06;C12P21/08;G01N33/569;G01N33/558 |
| 代理公司: | 上海浦一知識產權代理有限公司 31211 | 代理人: | 王函 |
| 地址: | 201203 上海市浦*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 結合 結核桿菌 噬菌體 尾部 蛋白 抗體 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種結合結核桿菌噬菌體尾部蛋白的抗體,該抗體能識別結核桿菌噬菌體。
2.如權利要求1所述的抗體,其特征在于,該抗體是單克隆抗體。
3.如權利要求1所述的抗體,其特征在于,該抗體是抗體片段。
4.如權利要求3所述的抗體,其特征在于,該抗體是Fab。
5.如權利要求1至4任一項所述的抗體,其特征在于,該抗體是標記的抗體。
6.如權利要求5所述的抗體,其特征在于,該抗體是膠體金標記的抗體。
7.如權利要求1所述的抗體,其特征在于,該抗體用含結核桿菌噬菌體尾部蛋白第20到80位氨基酸的多肽做抗原免疫小鼠獲得;該結核桿菌噬菌體尾部蛋白片段具有SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列和SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列。
8.一種包含權利要求1-7任一項所述的抗體的溶液和裝置。
9.一種產生權利要求1,2,3,4和7中任一項所述的抗體的細胞。
10.一種如權利要求1-7任一項所述的抗體的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)合成結核桿菌噬菌體尾部蛋白片段:通過分子克隆的方法將含SEQ?ID?NO:1序列的核酸插入到pcDNA3載體,測序鑒定后選正確克隆擴增,提取DNA后轉化大腸桿菌,表達并純化結核桿菌噬菌體尾部蛋白的片段;
(2)將步驟(1)純化的結核桿菌噬菌體尾部蛋白片段免疫小鼠,取脾細胞與骨髓瘤細胞融合,挑選產生抗體好的細胞株,注射小鼠腹腔;注射后10天左右抽取腹水并純化抗體。
11.一種結合結核桿菌噬菌體尾部蛋白的抗體在檢測結核桿菌中的應用,其特征在于,采用膠體金法免疫層析測試筆檢測結核桿菌噬菌體的方法,測試筆中膠體金標記的抗體為權利要求6所述的抗體,測試線上固定的抗體為權利要求1-4任一項所述的抗體。
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