[發明專利]果汁中耐熱菌的快速檢測方法

無效

• 申請號: 200910055289.6
• 申請日: 2009-07-24
• 公開（公告）號: CN101613739A
• 公開（公告）日: 2009-12-30
• 發明（設計）人: 賈彩鳳;葉建芳;李文俊;趙文超;莫小晶;高紅亮;常忠義
• 申請（專利權）人: 華東師范大學
• 主分類號: C12Q1/28
• 分類號: C12Q1/28;C12Q1/04;C12R1/01
• 代理公司: 上海藍迪專利事務所
• 代理人: 徐筱梅

1、一種果汁中耐熱菌的快速檢測方法，其特征在于該方法是在果汁中接種耐熱菌(BAM)培養基，使檢測樣品大量繁殖并迅速產生愈創木酚，利用愈創木酚在含有過氧化物酶的緩沖體系中與過氧化氫的反應，快速檢測果汁中的耐熱菌，具體檢測按下述步驟進行：

a、將檢測的果汁加熱，加熱溫度為80℃，時間為10min，然后加入含香草酸濃度為100ppm的耐熱菌(BAM)培養基為培養液，培養液在45℃溫度下，靜止培養24h，加滴的耐熱菌(BAM)培養基與果汁的體積比為3∶1；

b、在上述培養液中加入濃度為50ppm的鄰苯二甲酸氫鉀溶液、3％的過氧化氫溶液和20U/ml的過氧化物酶溶液混勻后，在室溫下反應10min，培養液與鄰苯二甲酸氫鉀溶液、過氧化氫溶液和過氧化物酶溶液的體積比分別為2∶1、20∶1和20∶3；

c、用分光光度計測定或用肉眼觀察上述反應的顏色變化，分光光度計測定OD470≥0.5或肉眼觀察上述反應出現紅褐色，則表示檢測的果汁中含有耐熱菌；分光光度計測定OD470＜0.5或肉眼觀察上述反應未出現紅褐色，則表示檢測的果汁中不含有耐熱菌。

2、根據權利要求1所述果汁中耐熱菌的快速檢測方法，其特征在于所述耐熱菌(BAM)培養基由培養基A液和培養基B液按體積比為1000∶1配制而成，培養基A液和培養基B液為下述組分混合而成，所述物質按重量百分比計：

A液：

CaCl₂.2H2O：??0.20～0.30g????MgSO₄.7H₂O：??0.45～0.55g

(NH₄)₂SO₄：???0.15～0.25g????酵母粉：??????1.50～2.50g

葡萄糖：??????4.50～5.50g????KH₂PO₄：??????2.50～3.50g

蒸餾水：??????1000mL

B液：

CaCl.2H₂O：???0.56～0.76mg????MnSO₄.4H₂O：??0.10～0.20mg

NaMoO₄.2H₂O：?0.25～0.35mg????ZnSO₄.7H2O：??0.10～0.30mg

CoCl₂.6H₂O：??0.10～0.30mg????CuSO₄.5H₂O：??0.10～0.30mg

H₃BO₃：???????0.05～0.15mg????蒸餾水：??????1.00mL

3、根據權利要求2所述果汁中耐熱菌的快速檢測方法，其特征在于所述培養基A液用硫酸酸化，其pH值為4.0。