[發(fā)明專利]活體穿刺技術(shù)檢查蟹類卵巢發(fā)育的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910054769.0
• 申請日: 2009-07-14
• 公開（公告）號: CN101612051A
• 公開（公告）日: 2009-12-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉智俊;吳旭干;成永旭;楊筱珍;李光霞;豐浪
• 申請（專利權(quán)）人: 上海海洋大學(xué)
• 主分類號: A61B10/00
• 分類號: A61B10/00
• 代理公司: 上海天翔知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 陳學(xué)雯

1.一種活體穿刺技術(shù)檢查蟹類卵巢發(fā)育的方法，包括以下步驟：

(1)穿刺部位為蟹頭胸甲前緣、靠近眼睛后的區(qū)域，所述穿刺部位打磨平整，以便于取樣后密封穿刺孔；同時將穿刺部位打磨變薄，以便于采用穿刺針扎入卵巢組織取樣；

步驟(1)中用砂紙或者微型拋光機(jī)將穿刺部位拋光平整，以便取樣后密封穿刺孔，防止海水進(jìn)入；打磨過程使穿刺部位變薄，便于穿刺針扎入蟹體內(nèi)進(jìn)行取樣；

(2)穿刺針穿透穿刺部位，迅速取樣后密封穿刺孔；

步驟(2)取樣完畢后用502膠和塑料片密封，等膠水固化后將蟹放回海水中；

(3)取樣的卵巢組織直接用肉眼觀察卵巢外觀，初步判斷其發(fā)育情況或用于組織學(xué)和分子生物學(xué)研究。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種活體穿刺技術(shù)檢查蟹類卵巢發(fā)育的方法，其特征在于：所述穿刺部位、微型拋光機(jī)、穿刺針經(jīng)過消毒，防止細(xì)菌感染造成蟹的死亡。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種活體穿刺技術(shù)檢查蟹類卵巢發(fā)育的方法，其特征在于：步驟(2)所述穿刺孔的孔徑為0.46-1.31mm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種活體穿刺技術(shù)檢查蟹類卵巢發(fā)育的方法，其特征在于：所述塑料片柔軟、完全貼合蟹甲殼表面，且不透水。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種活體穿刺技術(shù)檢查蟹類卵巢發(fā)育的方法，其特征在于：所述502膠選用凝固性佳，在5分鐘內(nèi)完全凝固。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種活體穿刺技術(shù)檢查蟹類卵巢發(fā)育的方法，其特征在于：步驟(3)中利用組織學(xué)統(tǒng)計卵母細(xì)胞直徑，所述卵母細(xì)胞的直徑是指長徑，然后推算卵巢指數(shù)，是指利用卵母細(xì)胞細(xì)胞直徑與卵巢指數(shù)的回歸方程來計算卵巢指數(shù)。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種活體穿刺技術(shù)檢查蟹類卵巢發(fā)育的方法，其特征在于：用于預(yù)測雌體卵巢指數(shù)的回歸方程的回歸曲線統(tǒng)計卵巢發(fā)育三期的雌體30個以上，統(tǒng)計優(yōu)勢卵母細(xì)胞的長徑，所述卵巢發(fā)育三期主要為外源性卵黃合成期的卵母細(xì)胞；所述優(yōu)勢卵母細(xì)胞是指同一個體的切片中，該類型的細(xì)胞必需占細(xì)胞總數(shù)的70％以上。