[發明專利]一種用于檢測抗膜突蛋白抗體的試劑盒

有效

• 申請號: 200910053508.7
• 申請日: 2009-06-19
• 公開（公告）號: CN101929999A
• 公開（公告）日: 2010-12-29
• 發明（設計）人: 曾小峰;李夢濤;尹雷;艾軍;趙久良;王遷;張玥;黃嵐;楊超文;李春梅;孫宏彬;錢杰
• 申請（專利權）人: 上海科新生物技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/531;G01N21/31
• 代理公司: 上海光華專利事務所 31219
• 代理人: 余明偉

1.一種用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測板，所述的檢測板包括：固相載體和包被于所述固相載體的膜突蛋白抗原蛋白，所述膜突蛋白抗原蛋白為全長人膜突蛋白。

2.如權利要求1所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測板，其特征在于，所述抗膜突蛋白抗體為IgG型。

3.如權利要求1所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測板，其特征在于，所述固相載體為酶標反應板。

4.權利要求1-3中任一權利要求所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測板的制備方法，包括如下步驟：

a)包被：用包被緩沖液稀釋膜突蛋白抗原蛋白，然后將該抗原蛋白溶液加入到固相載體上進行包被，包被完畢后洗滌并干燥；

b)封閉：加入封閉液后進行封閉，封閉完畢后洗滌并干燥；

c)制板：以室溫20℃～25℃真空干燥2小時，干燥過程中的壓強不超過-0.094Mpa；然后進行真空密封，2℃～8℃儲存。

5.如權利要求4所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測板的制備方法，其特征在于，所述步驟a)中的包被緩沖液為PBS溶液。

6.如權利要求4所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測板的制備方法，其特征在于，所述步驟a)中所述抗原蛋白溶液的濃度為2～5μg/ml。

7.如權利要求4所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測板的制備方法，其特征在于，所述步驟a)中的所述包被在2～8℃的溫度下進行17小時。

8.如權利要求4所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測板的制備方法，其特征在于，所述步驟b)中的所述封閉液為10mM?PBS溶液，pH7.0～pH7.4，其中含有質量百分比為5～10％的山羊血清以及質量百分比為10％的蔗糖。

9.一種用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測試劑盒，所述的檢測試劑盒包含權利要求1中所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測板，或者分別包裝的固相載體和膜突蛋白抗原蛋白，所述膜突蛋白抗原蛋白為全長人膜突蛋白。

10.如權利要求9所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還包括標記抗體，該標記抗體上標記有能產生檢測信號的物質，且所述抗體能夠與抗膜突蛋白抗體相結合。

11.如權利要求9所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測試劑盒，其特征在于，所述能產生檢測信號的物質選自：過氧化物酶、β-半乳糖苷酶和堿性磷酸酶。

12.如權利要求9所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還包括與能產生檢測信號的物質相對應的顯色液。

13.如權利要求9所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還包括：包被緩沖液、樣品緩沖液、封閉液、洗滌緩沖液和終止液中的一種或多種。

14.權利要求9-13中任一權利要求所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟：

①、抗原抗體反應：將膜突蛋白抗原蛋白包被在固相載體上，然后在固相載體的微孔內分別加入待測樣品；

②、酶聯反應：將標記抗體溶液加入各孔，振蕩、孵育；然后洗滌；在每孔加入與能產生檢測信號的物質相對應的顯色劑，避光孵育；

③、測定光吸收值。

15.如權利要求14所述用于檢測抗膜突蛋白抗體的檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，所述步驟①中的待測樣品選自血液、血清和血漿。

16.一種檢測抗膜突蛋白抗體的方法，包括如下步驟：

(a)將待測樣品加樣于包被有膜突蛋白抗原蛋白的固相載體，從而使待測樣品中的抗膜突蛋白抗體與固相載體上的膜突蛋白抗原蛋白結合，形成“抗膜突蛋白抗體-膜突蛋白抗原蛋白”二元復合物；所述膜突蛋白抗原蛋白為全長人膜突蛋白；

(b)將標記抗體加樣于步驟a)中獲得的二元復合物，形成“標記抗體-抗膜突蛋白抗體-膜突蛋白抗原蛋白”三元復合物；所述標記抗體為標記有檢測信號產生工具，且能夠與抗膜突蛋白抗體相結合的抗體；

(c)通過使用與檢測信號相匹配的檢測工具對三元復合物產生的信號進行檢測，從而確定待測樣品中抗膜突蛋白抗體的含量及是否達到臨床參考臨界值。