[發明專利]一種鑒定目標核酸的方法

有效

• 申請號: 200910052126.2
• 申請日: 2009-05-27
• 公開（公告）號: CN101899497A
• 公開（公告）日: 2010-12-01
• 發明（設計）人: 華紹炳
• 申請（專利權）人: 杭州德同生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 范征;陳靜

1.一種鑒定目標核酸的方法，所述方法依次包括：

(a)將待測的核酸樣本解鏈處理，得到單鏈核酸樣本；

(b)將特異性識別目標核酸的探針與步驟(a)獲得的單鏈核酸樣本雜交，其中，當目標核酸是DNA時，所述探針是RNA；當目標核酸是RNA時，所述探針是DNA；得到雙鏈雜交體樣本；和

(c)將步驟(b)獲得的雙鏈雜交體捕獲到固相載體上，測定被捕獲的雜交體。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(c)中，將雙鏈雜交體捕獲到固相載體上包括：將雙鏈雜交體樣本、檢測抗體加樣到包被有包被抗體的固相載體上，在固相載體上形成包被抗體-雙鏈雜交體-檢測抗體三元復合物；其中，所述的檢測抗體是抗所述雙鏈雜交體的抗體，其攜帶有可檢測信號；所述的包被抗體是抗所述雙鏈雜交體的抗體。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的可檢測信號選自：堿性磷酸酶，辣根過氧化物酶，葡萄糖氧化酶，β-D-半乳糖苷酶，脲酶，過氧化氫酶或葡萄糖淀粉酶。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，測定被捕獲的雜交體包括：加入識別所述可檢測信號的底物，測定底物的顯色情況。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(b)中，所述的探針上攜帶標記物；

步驟(c)中，所述的固相載體上包被有特異性結合所述標記物的結合物。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述的標記物是生物素，所述的結合物是親和素；或

所述的標記物是他克莫司，所述的結合物是他克莫司結合蛋白。

7.如權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(c)中，將雙鏈雜交體捕獲到固相載體上包括：將雙鏈雜交體樣本、檢測抗體加樣到包被有結合物的固相載體上，在固相載體上形成結合物-標記物-雙鏈雜交體-檢測抗體四元復合物；所述的檢測抗體是抗所述雙鏈雜交體的抗體，其攜帶有可檢測信號。

8.一種鑒定目標核酸的檢測試劑盒，所述試劑盒含有：

(1)特異性識別目標核酸的探針，所述的探針能夠與目標核酸結合形成雙鏈雜交體；其中，當目標核酸是DNA時，所述探針是RNA；當目標核酸是RNA時，所述探針是DNA；

(2)檢測抗體，所述的檢測抗體是抗所述雙鏈雜交體的抗體，其攜帶有可檢測信號；和

(3)包被有包被抗體的固相載體，所述的包被抗體是抗所述雙鏈雜交體的抗體。

9.一種鑒定目標核酸的檢測試劑盒，所述試劑盒含有：

(1)特異性識別目標核酸的探針，所述的探針能夠與目標核酸結合形成雙鏈雜交體；其中，當目標核酸是DNA時，所述探針是RNA；當目標核酸是RNA時，所述探針是DNA；并且，所述的探針上攜帶標記物；

(2)檢測抗體，所述的檢測抗體是抗所述雙鏈雜交體的抗體，其攜帶有可檢測信號；和

(3)固相載體，其包被有特異性結合所述標記物的結合物。

10.如權利要求8或9所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還含有：

(4)核酸解鏈試劑；

(5)洗滌試劑；

(6)識別所述可檢測信號的底物；或

(7)顯色劑。