[發明專利]一種篩選菌種的方法及其引物和試劑盒無效
| 申請號： | 200910050125.4 | 申請日： | 2009-04-28 |
| 公開（公告）號： | CN101875964A | 公開（公告）日： | 2010-11-03 |
| 發明（設計）人： | 張紅發;舒妹;王蔭榆;沈玲 | 申請（專利權）人： | 光明乳業股份有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海智信專利代理有限公司 31002 | 代理人： | 薛琦;朱水平 |
| 地址： | 20110*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 篩選 菌種 方法 及其 引物 試劑盒 | ||
1.一種篩選菌種的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)提取待篩樣品中的基因組DNA，利用目標菌特異性的PCR引物進行PCR反應，選擇有特異性擴增的樣品作為含有目標菌的進一步篩選樣品；
2)將步驟1)所述的含有目標菌的進一步篩選樣品培養分離，挑選單克隆，提取單克隆的基因組DNA，用所述的目標菌特異性的PCR引物進行PCR反應，選擇有特異性擴增的單克隆即為目標嫌疑菌；
3)目標嫌疑菌進行菌種鑒定，確定目標菌。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述的待篩樣品是動物或人的糞便。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的目標菌是雙歧桿菌。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)或步驟2)所述的目標菌特異性的PCR引物選自特異性擴增目標菌核糖體基因、或種屬特異性蛋白或酶基因的引物。
5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述的目標菌特異性的PCR引物是堿基序列如序列表中SEQ?NO：1或SEQ?NO：2所示的引物。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)所述的培養分離的方法是選擇富集培養法、稀釋計數法、劃線分離法或這些方法的組合。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)所述的菌種鑒定的方法是基因測序鑒定法或者傳統的生化鑒定方法。
8.一種引物，其特征在于，其堿基序列是序列表中SEQ?NO：1或SEQNO：2所示。
9.一種試劑盒，其特征在于，包括如權利要求8所述的引物。
10.如權利要求9所述的試劑盒，還包括耐熱DNA聚合酶和/或PCR反應緩沖溶液。
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