[發(fā)明專利]沼濕草的組織培養(yǎng)方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910049979.0
• 申請日: 2009-04-24
• 公開（公告）號: CN101869071A
• 公開（公告）日: 2010-10-27
• 發(fā)明（設計）人: 陳建華;黃建榮;沈勤
• 申請（專利權）人: 上海上房園林植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海科盛知識產(chǎn)權代理有限公司 31225
• 代理人: 林君如

技術領域

本發(fā)明涉及一種植物的組織培養(yǎng)方法，尤其是涉及沼濕草的組織培養(yǎng)方法。

背景技術

沼濕草為禾本科沼濕草屬植物，緊湊叢生，高可達90cm，冠幅45cm。葉有白色條紋，長17-25cm，花莖緊湊直立，稍帶拱形，棕色圓錐形花序與綠色葉片對比鮮明，開花時，草的整體外觀更加挺直。該草喜陽光充足或半陰環(huán)境，可耐輕度干旱或輕度潮濕的土壤，抗病蟲害能力強。秋季，草體下部葉片會變成黃色或淺紅色，觀賞性更強。可用于園林綠化、岸邊或庭院中栽培，具有優(yōu)良的生態(tài)適應性和觀賞價值。但是作為國外引進的新品種，該植物的引種數(shù)量較少，種苗供應受限制。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術存在的缺陷而提供一種可提高繁殖速度和苗的整齊度的沼濕草的組織培養(yǎng)方法。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術方案來實現(xiàn)：

沼濕草的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)無菌材料的獲得

在春季取萌發(fā)的沼濕草的小芽，除去葉片，用自來水沖洗1-3h，再于超凈工作臺上，依次利用質量濃度為70-75％的乙醇浸泡10-50s，體積濃度為0.5-2‰的汞浸泡10-30min，再用無菌水沖洗4-6次，利用無菌濾紙吸干小球莖表面的水分后，將小球莖切成0.5-2cm的帶腋芽的節(jié)段，節(jié)段接種于腋芽誘導培養(yǎng)基上；

(2)芽的分化和增殖

節(jié)段接種于腋芽誘導培養(yǎng)基上1-3周后，腋芽部位開始膨大，出現(xiàn)綠色突起，3-4周后節(jié)段上可以看見芽分生組織，再培養(yǎng)1-2個月，芽可以長到3-4cm長，將不定芽切下移入不定芽增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，不定芽基部的愈傷組織較多，但不定芽仍增殖較快，生長發(fā)育良好，并無玻璃化等不良現(xiàn)象；

(3)不定芽壯苗培養(yǎng)

在不定芽增殖培養(yǎng)基里誘導出的不定芽處于矮化狀態(tài)，將不定芽分成小叢，然后將分成小叢的不定芽轉至壯苗培養(yǎng)基上，不定芽迅速伸長，20-30天后可以長到3-4cm；

(4)生根培養(yǎng)

取3-4cm的不定芽小植株，轉接入生根培養(yǎng)基中誘導生根，8-15天后小植株幼苗的基部分化出白色的根原基，25-35天后可以長至4-6cm，根系粗壯，須根眾多，生根率為90-100％；

(5)煉苗與移栽

在生根培養(yǎng)15-25天，根系長至0.5-2cm時，選擇根系發(fā)達、生長健壯的無菌幼苗，于室內開瓶煉苗1-3天，然后將苗取出，洗凈其根部的瓊脂，栽于溫室內的苗床中馴化25-40天，即可移栽室外，并給予肥水管理，移栽成活率為90-100％。

所述的腋芽誘導培養(yǎng)基包括MS+6-BA1.0-3.0mg/L+NAA0.05-0.2mg/L。

所述的不定芽增殖培養(yǎng)基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.05-0.2mg/L。

所述的不定芽增殖培養(yǎng)基優(yōu)選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

所述的壯苗培養(yǎng)基包括MS+6-BA0.05-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。

所述的壯苗培養(yǎng)基優(yōu)選MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。

所述的生根培養(yǎng)基包括MS+NAA0.1-0.3mg/L。

所述的生根培養(yǎng)基優(yōu)選MS+NAA0.1mg/L。

所述的培養(yǎng)基還包括蔗糖20-40g/L、瓊脂粉4-8g/L，培養(yǎng)基pH5.5-6.0，培養(yǎng)溫度24-26℃，光照1500-2500lx。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明通過組織培養(yǎng)技術，極大提高了沼濕草的繁殖速度和苗的整齊度，可以實現(xiàn)育苗的工廠化大批量生產(chǎn)。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發(fā)明進行詳細說明。

實施例1

(1)無菌材料的獲得

在春季取萌發(fā)的沼濕草的小芽，除去葉片，用自來水沖洗1h，再于超凈工作臺上，依次利用質量濃度為70％的乙醇浸泡10s，體積濃度為0.5‰的汞浸泡10min，再用無菌水沖洗4次，利用無菌濾紙吸干小球莖表面的水分后，將小球莖切成0.5cm的帶腋芽的節(jié)段，節(jié)段接種于包括MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L的腋芽誘導培養(yǎng)基上；

(2)芽的分化和增殖