[發(fā)明專利]金葉絲蘭的組織培養(yǎng)方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910049971.4
• 申請日: 2009-04-24
• 公開（公告）號: CN101869063A
• 公開（公告）日: 2010-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳建華;黃建榮;沈勤
• 申請（專利權(quán)）人: 上海上房園林植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上?？剖⒅R產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 林君如

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種植物的組織培養(yǎng)方法，尤其是涉及金葉絲蘭的組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

金葉絲蘭為百合科絲蘭屬植物，常綠小灌木，葉面有皺紋，濃綠色而被少量白粉，有黃色條紋，老葉具少數(shù)絲狀物。夏秋間開花，抗旱能力特強(qiáng)。金葉絲蘭是花葉俱美的觀賞植物，對有害氣體如二氧化硫、氟化氫、氯氣、氨氣等均有很強(qiáng)的抗性和吸收能力，并且還是良好的花鏡、庭院材料。但是，作為國外引進(jìn)的新品種，金葉絲蘭引種數(shù)量較少，其根蘗繁殖、分株繁殖慢，因此種苗供應(yīng)受限制。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種可提高繁殖速度和苗的整齊度，并提高性狀穩(wěn)定性的金葉絲蘭的組織培養(yǎng)方法。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：

金葉絲蘭的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)無菌材料的獲得

取萌發(fā)的幼嫩的芽，去除外面包裹的葉片后，用自來水沖洗1-3h后于超凈工作臺(tái)上，依次利用質(zhì)量濃度為70-75％的乙醇浸泡10-50s，體積濃度為0.5-2‰的汞浸泡10-30min，再用無菌水沖洗4-6次，利用無菌濾紙吸干芽表面的水分后，將芽切成0.5-2cm長的帶芽的節(jié)段，節(jié)段接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上；

(2)芽的分化和增殖

節(jié)段接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上2-4周后，芽部位開始膨大，出現(xiàn)黃綠色突起，3-5周后可見芽分生組織，再培養(yǎng)1-2個(gè)月，芽可以長到1-3cm，將不定芽切下轉(zhuǎn)入不定芽增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，芽的基部雖有較多愈傷組織，但不影響不定芽的增殖，不定芽生長迅速且無玻璃化等不良現(xiàn)象，在培養(yǎng)基中生長發(fā)育良好；

(3)不定芽壯苗培養(yǎng)

在不定芽增殖培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)出的叢生芽中每叢有2-3株能夠伸長，其余的處于矮化狀態(tài)，將叢生芽分成小叢后，轉(zhuǎn)至壯苗培養(yǎng)基上生長，不定芽迅速伸長，20-40天后可以長至1.5-3cm；

(4)生根培養(yǎng)

取1.5-3cm的不定芽小植株，轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，5-15天后幼苗基部分化出白色的根原基，25-35天后可以長至2-3cm，根系粗壯，須根眾多，生根率為90-100％；

(5)煉苗與移栽

生根培養(yǎng)20-30天，根系長至1-2cm時(shí)，選擇根系發(fā)達(dá)、生長健壯的無菌苗，于室內(nèi)開瓶煉苗1-3天，然后將苗取出，洗凈根部的瓊脂，栽于溫室內(nèi)的苗床中馴化20-40天，即可移栽室外，給予肥水管理，最終的移栽成活率為90-100％。

所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括MS+6-BA1.0-3.0mg/L+NAA0.1-0.3mg/L。

所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基優(yōu)選MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。

所述的不定芽增殖培養(yǎng)基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。

所述的不定芽增殖培養(yǎng)基優(yōu)選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

所述的壯苗培養(yǎng)基包括MS+6-BA0.5-2.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L。

所述的壯苗培養(yǎng)基優(yōu)選MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。

所述的生根培養(yǎng)基包括MS+NAA0.05-0.2mg/L。

所述的生根培養(yǎng)基優(yōu)選MS+NAA0.1mg/L。

所述的培養(yǎng)基還包括蔗糖20-40g/L、瓊脂粉4-8g/L，培養(yǎng)基pH5.5-6.0，培養(yǎng)溫度24-26℃，光照1500-2500lx。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過組培技術(shù)，極大提高了金葉絲蘭的繁殖速度和苗的整齊度，并提高了其性狀的穩(wěn)定性，可實(shí)現(xiàn)育苗的工廠化大批量生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

(1)無菌材料的獲得

取萌發(fā)的幼嫩的芽，去除外面包裹的葉片后，用自來水沖洗1h后于超凈工作臺(tái)上，依次利用質(zhì)量濃度為70％的乙醇浸泡10s，體積濃度為0.5‰的汞浸泡10min，再用無菌水沖洗4次，利用無菌濾紙吸干芽表面的水分后，將芽切成0.5cm長的帶芽的節(jié)段，節(jié)段接種于包括MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上；

(2)芽的分化和增殖